🍎 肉与肉制品中的游离脂肪——溶剂萃取（索氏提取）
三句话速览
将5～8 g肉样烘干后用正己烷或石油醚萃取（索氏提取器中至少6 h）；蒸去溶剂并将烧瓶在103 °C下烘干后，由质量增量计算游离脂肪含量。该检测依据 PN-ISO 1444:2000；试样量：5～8 g，称准至0.001 g；试样中游离脂肪的最低量不少于0.05 g。整个程序共 9 个步骤（合计约 9 小时）；主要用于：测定生鲜肉与肉制品（香肠、罐头）中的脂肪含量、科研与工艺研究中肌肉的基本化学组成、与产品规格及营养声称符合性的控制。
要点速览
- 标准: PN-ISO 1444:2000
- 类别: 食品化学
- 操作步骤数: 9
- 各步骤合计时间: 9 小时
- 试样量: 5～8 g，称准至0.001 g；试样中游离脂肪的最低量不少于0.05 g
- 溶剂: 正己烷或石油醚，沸程40～60 °C，溴值 < 1，每100 ml蒸发残渣 ≤ 0.002 g
- 萃取时间: 至少6 h（索氏）；Soxtec或其他自动化系统中至少2 h
概述
本标准规定了用萃取法测定肉与肉制品中游离脂肪含量的方法。游离脂肪是指在本标准条件下萃取出的脂肪质量除以试样质量，以质量分数表示。本说明依据PN-ISO 1444:2000所采用的ISO 1444:1996（法文版）的预览内容编写。
该方法包括：用正己烷或石油醚萃取按ISO 1442所述测定水分的方法得到的干燥残渣，蒸去溶剂，然后将提取物烘干并称量。实验室样品（至少200 g）用机械或电动方式均质，使其温度不超过25 °C，并尽快分析，无论如何应在24 h内完成。
按PN-ISO 1444:2000测定脂肪常规用于肉类化学组成的研究（例如克拉科夫农业大学关于牛肉肌肉的一项研究），并列入QAFP质量体系肉类罐头行业分册的检验方法目录。
方法原理
将5～8 g制备好的试样（称准至0.001 g）按ISO 1442烘干；也可使用水分测定中得到的干燥试样。将干燥残渣全部转移至已脱脂的纸质萃取套筒中，在连续或半连续式装置（索氏型）中用沸程40～60 °C的溶剂萃取至少6 h（Soxtec或其他自动化系统：至少2 h）。蒸去溶剂，将烧瓶在103 ± 2 °C烘箱中烘干1 h，于干燥器中冷却，称准至0.001 g，重复烘干直至连续两次称量之差不超过试样质量的0.1 %。游离脂肪含量：wf = (m2 − m1)/m0 × 100 %，其中m0为供烘干的试样质量，m1为烧瓶与沸石的质量，m2为烘干后烧瓶、沸石与脂肪的质量。结果保留一位小数。
应用领域
- 测定生鲜肉与肉制品（香肠、罐头）中的脂肪含量
- 科研与工艺研究中肌肉的基本化学组成
- 与产品规格及营养声称符合性的控制
- QAFP肉类罐头质量体系的检验方法目录
关键参数
| 参数 | 数值 |
|---|---|
| 试样量 | 5～8 g，称准至0.001 g；试样中游离脂肪的最低量不少于0.05 g |
| 溶剂 | 正己烷或石油醚，沸程40～60 °C，溴值 < 1，每100 ml蒸发残渣 ≤ 0.002 g |
| 萃取时间 | 至少6 h（索氏）；Soxtec或其他自动化系统中至少2 h |
| 烧瓶烘干 | 103 ± 2 °C下1 h，至恒重（差值 ≤ 试样质量的0.1 %） |
| 精密度 | r = 0.05 + 0.06·wf；R = 0.04 + 0.06·wf（wf为两次结果的平均值，质量分数） |
| 结果 | 修约至一位小数 |
标准
- 标准编号
- PN-ISO 1444:2000
- 标准名称（波兰语）
- Mięso i przetwory mięsne — Oznaczanie zawartości tłuszczu wolnego
- 标准名称（英语）
- Meat and meat products — Determination of free fat content
分步操作程序
-
试样制备
将实验室样品（至少200 g）均质，使温度不超过25 °C；使用绞肉机时至少绞两遍。置于密闭容器中保存并在24 h内分析。
-
称样与烘干
称取5～8 g试样，准确至0.001 g（m0），按ISO 1442烘干；也可使用水分测定中得到的干燥试样。
-
烧瓶准备
将装有沸石的装置烧瓶在103 °C烘箱中烘干1 h，于干燥器中冷却至环境温度，称准至0.001 g（m1）。
-
装填套筒
将干燥试样从蒸发皿中全部转入萃取套筒；用蘸有溶剂的棉花擦净残余并一并放入套筒。将套筒置于萃取器中。
-
萃取
向烧瓶中加入体积至少为萃取器容量1.5～2倍的溶剂，装配好装置并在浴上加热至少6 h（Soxtec或其他自动化技术：至少2 h）。
-
蒸去溶剂
萃取结束后在砂浴或水浴上蒸去烧瓶中的溶剂；必要时用气流除去最后的痕量溶剂。
-
烘至恒重
将烧瓶在103 °C下烘干1 h，于干燥器中冷却并称准至0.001 g。重复加热、冷却与称量，直至连续两次称量之差不超过试样质量的0.1 %（m2）。
-
萃取完全性检查
换一个烧瓶，用新鲜溶剂再萃取1 h；质量增量不得超过试样质量的0.1 %。
-
计算与检验报告
wf = (m2 − m1)/m0 × 100 %；结果保留一位小数，并给出取样方式、所用方法以及对本标准的任何偏离。重复性条件下两次结果之差不宜超过r = 0.05 + 0.06·wf。
所需设备与仪器
| 设备 | 示例 | 参考价格 |
|---|---|---|
| 均质机 | 高速旋转刀具或带孔径不大于4 mm筛板的绞肉机 | — |
| 连续或半连续式萃取装置 | 索氏型；允许使用可同时萃取多个试样的系统，例如Soxtec | — |
| 萃取套筒 | 滤纸制，已脱脂；另备脱脂棉 | — |
| 砂浴或水浴 | 电加热或其他适用装置 | — |
| 烘箱 | 电加热，控温103 ± 2 °C | — |
| 分析天平与干燥器 | 精度0.001 g；干燥器内装有效干燥剂，例如硅胶 | — |
试剂、培养基与耗材
| 试剂 | CAS | 详情 |
|---|---|---|
| 正己烷 | 110-54-3 | 萃取溶剂；溴值低于1，完全蒸发后每100 ml残渣不超过0.002 g |
| 石油醚 | — | 替代溶剂，沸程40～60 °C，纯度要求相同 |
| 沸石 | — | 放入萃取装置的烧瓶中；与烧瓶一并称量 |
职业健康与安全
- 正己烷与石油醚高度易燃——萃取与蒸发应在通风橱内、远离火源进行，浴应采用电加热
- 溶剂蒸气作用于神经系统——保持通风并确保装置密闭
- 从103 °C烘箱取出的热烧瓶——使用坩埚钳与手套；在干燥器中冷却
常见问题
该检测依据哪项标准？
该检测依据的标准为 PN-ISO 1444:2000 — 《Meat and meat products — Determination of free fat content》。
该方法的原理是什么？
将5～8 g制备好的试样（称准至0.001 g）按ISO 1442烘干；也可使用水分测定中得到的干燥试样。
测量范围和准确度是多少？
试样量：5～8 g，称准至0.001 g；试样中游离脂肪的最低量不少于0.05 g；溶剂：正己烷或石油醚，沸程40～60 °C，溴值 < 1，每100 ml蒸发残渣 ≤ 0.002 g；萃取时间：至少6 h（索氏）；Soxtec或其他自动化系统中至少2 h；烧瓶烘干：103 ± 2 °C下1 h，至恒重（差值 ≤ 试样质量的0.1 %）。
完成检测需要多长时间？
各步骤所列时间合计约为 9 小时。整个程序共 9 个步骤。
需要哪些设备？
均质机、连续或半连续式萃取装置、萃取套筒、砂浴或水浴、烘箱、分析天平与干燥器。
该检测用于哪些场景？
测定生鲜肉与肉制品（香肠、罐头）中的脂肪含量；科研与工艺研究中肌肉的基本化学组成；与产品规格及营养声称符合性的控制；QAFP肉类罐头质量体系的检验方法目录。
需要采取哪些安全防护措施？
正己烷与石油醚高度易燃——萃取与蒸发应在通风橱内、远离火源进行，浴应采用电加热；溶剂蒸气作用于神经系统——保持通风并确保装置密闭；从103 °C烘箱取出的热烧瓶——使用坩埚钳与手套；在干燥器中冷却。
哪家实验室可以开展此项检测？
该检测由通过 ISO/IEC 17025 认可的实验室开展。在 LabCoda 上可按标准编号检索 PN-ISO 1444。