🍎 用 HPLC 测定食品中的三氯蔗糖——可溶性样品用水溶解，不完全溶解的样品（糕点、口香糖、酸奶、番茄酱、蛋黄酱）在 40–60 °C 与水混合，必要时用改良卡雷兹溶液澄清；用 500 mg C18 固相萃取柱净化，以甲醇/水 1 + 3 洗脱，在 35 °C 的 RP-18 色谱柱（250 × 4 mm）上分离，用 30 °C 的示差折光（RI）检测器或 ELSD 检测；至少 5 个标准溶液（如 20–100 mg/l），结果以 mg/kg 或 mg/l 表示；验证范围 83–737 mg/kg；PN-EN 16155:2012

食品化学 PN-EN 16155

概述

本标准涵盖的内容。标准正文我们读的是 iTeh 的 SIST EN 16155:2012 样本（斯洛文尼亚采用的 2012 年 4 月版 EN 16155:2012，英文文本）——PN-EN 16155:2012 等同采用 EN 16155:2012（PKN 检索）：目录、前言、第 1–7 章和第 8 章至 8.2——样本止于标准第 7 页。精密度其余部分（8.2–8.3：重复性和再现性数值）、试验报告（9）以及附录 A（实验室间试验统计数据）我们未读；其标题来自目录。

依据 EN 16155:2012 正文。本标准由 CEN/TC 275“食品分析——横向方法”（秘书处 DIN）制定；CEN 于 25.02.2012 批准，各国最迟应于 2012 年 10 月采用。范围（1）：用 HPLC 测定食品中的三氯蔗糖，以含水甲醇从反相柱洗脱，RI 检测；方法经实验室间研究验证，三氯蔗糖 83 至 737 mg/kg，加标样品包括番茄酱、蛋黄酱、饼干、酸奶、速溶饮料粉、糖果。引用文件（2）：EN ISO 3696:1995（水）。原理（3）：样品视稠度用水溶解或稀释，必要时过滤或用改良卡雷兹溶液澄清；然后在固相萃取柱上萃取，用甲醇/水洗脱；在 RP 柱上用含水甲醇和 RI 检测器（或 ELSD）进行 HPLC 测定；外标法定量；三氯蔗糖含量指用本方法测得的 1,6-二氯-1,6-二脱氧-β-D-呋喃果糖基-4-氯-4-脱氧-α-D-吡喃半乳糖苷含量。试剂（4）：三氯蔗糖 C12H19Cl3O8，分子量 397.63；三水亚铁氰化钾；六水硝酸锌；HPLC 级甲醇；储备液约 1000 mg/l（约 100 mg 溶于 100 ml 水，每天新配，需考虑标准物质的水分和纯度）；至少五个标准溶液，如 20、40、60、80 和 100 mg/l，每天新配，不得超出检测器线性范围；卡雷兹溶液 A——53.45 g 亚铁氰化钾定容至 500 ml；溶液 B——148.75 g 硝酸锌定容至 500 ml；洗脱液——甲醇与水 1 + 3（体积比）。仪器（5）：孔径不超过 0.45 µm 的滤膜；500 mg C18 固相萃取柱；HPLC，包括泵、进样器、恒温 RI 检测器或 ELSD、柱温箱；C-18 反相色谱柱 250 mm × 4 mm（如 5 µm），带保护柱。步骤（6）：均质化（液体——搅拌，硬糖——粉碎，口香糖——深冷后粉碎，酸奶和番茄酱——搅拌，必要时澄清）；可溶性样品（如硬糖）——约 5 g，称准至 1 mg，置于 50 ml 容量瓶中加水，浑浊时过滤；不完全溶解的样品（糕点、口香糖、酸奶、番茄酱、蛋黄酱）——约 5 g 加约 25 ml 水，在约 40–60 °C 搅拌 30 min 或超声处理，含蛋白质样品——各加 1 ml 卡雷兹溶液 A 和 B，冷却后定容，用折叠滤纸和滤膜过滤；固相萃取——用甲醇和水活化，上样 5 ml 样品溶液，用 5 ml 水洗三次，期间不得干柱，用 5 ml 洗脱液洗脱至 10 ml 容量瓶，定容，过滤至进样瓶；HPLC（对 5.5 的色谱柱）：进样量不超过 100 µl，洗脱液 4.8，柱温 35 °C，RI 检测器 30 °C，流速约 1.2 ml/min；按保留时间及向样品中加入标准（峰重叠）鉴定；由峰面积通过校准函数 y = a + bx 定量，须检查其适用性。计算（7）：ρ 或 w = (R − a) · V / (b · m)，单位 mg/l 或 mg/kg，如 V = 50 ml，m = 5 g；结果修约至整数。精密度（8.1–8.2）：数据来自 2007/2008 年的两次实验室间试验——番茄酱、高低含量蛋黄酱、饼干、酸奶、2 种饮料粉、2 种压片糖果；这些数值可能不适用于其他浓度范围和基质；重复性限 r 被超过的情况不超过 5 %，取决于浓度水平。

状态（截至 03.10.2026）。PKN 检索（关键词“PN-EN 16155”，03.10.2026）列出 PN-EN 16155:2012——英文版，“采用：EN 16155:2012 [IDT]”，无撤销标注；结果中没有波兰文版。

实验室数量及引用形式（认可范围数据库副本，数据截至 17.09.2026，读取于 03.10.2026）。编号 16155 出现在 2 家实验室的 3 条记录中：AB 370（2 条）和 AB 592（1 条）。在 PCA 现行文件中（读取于 03.10.2026；AB 592 第 24 版 06.02.2026，AB 370 第 25 版 04.08.2026）该编号出现于相同的 2 家实验室；每份文件的页码标记数等于 PDF 页数，无重复；检索 03.10.2026 从 BIP 下载的全部 PCA 文件，未发现数据库副本以外的实验室。两家均为“PN-EN 16155:2012”。这些项目均未被暂停。“实验室”标签页（关键词“PN-EN 16155”）显示这两家实验室——已于 03.10.2026 在 labcoda.pl 生产服务器上通过标签页查询核实。

实验室检测内容（PCA 中的项目）。AB 592：鱼类和其他水生动物及其制品、水果和蔬菜制品、软饮料、糖果、食品添加剂——三氯蔗糖 (5–1800) mg/kg (mg/l)，HPLC-RID。AB 370：软饮料和果蔬汁——三氯蔗糖的存在和含量 (10–1000) mg/l；蔬菜制品（番茄酱）——(50–1000) mg/l，HPLC-RID。

容易得到看似正确结果的地方。验证范围：方法在所列基质中验证范围为 83 至 737 mg/kg，精密度数据可能不适用于其他浓度和基质（1、8.1）——PCA 项目从 5 到 1800 mg/kg，并包括鱼类和食品添加剂等，即超出这些界限。RI 检测器：示差折光检测不具选择性——标准依靠保留时间和向样品加标进行鉴定（6.4）；检测器需要稳定的温度（30 °C）（6.3）。线性：不得超出检测器线性范围，须检查校准函数的适用性（4.6、6.5）。固相萃取：洗涤时柱子不得干涸（6.2.3）。标准：每天配制储备液时须考虑标准物质的纯度和水分（4.5）。单位：番茄酱以 mg/l 表示的结果（AB 370）与标准给出验证范围所用的 mg/kg 基准不同（1、7）。

我们不提供的内容。重复性限和再现性限数值以及附录 A 的数据我们不引用——它们在样本之外。本条目不概述 EN ISO 3696 的内容。我们不提供食品中三氯蔗糖的允许含量。

方法原理

样品用水溶解或提取（含蛋白质样品用卡雷兹溶液澄清），三氯蔗糖保留在 C18 柱上，再用甲醇/水洗脱。提取液在反相柱上用含水甲醇分离，用示差折光检测器（或 ELSD）测定。按保留时间和加标鉴定三氯蔗糖，由峰面积通过至少五个标准建立的线性校准函数计算含量。

应用领域

• 食品中的三氯蔗糖：番茄酱、蛋黄酱、饼干、酸奶、速溶饮料粉、糖果——验证范围 83–737 mg/kg（1）
• 可溶性样品（硬糖）和不完全溶解样品（糕点、口香糖、酸奶、番茄酱、蛋黄酱）（6.2）
• 饮料、果蔬汁、水果和蔬菜制品、糖果、鱼制品、食品添加剂——PCA 中 2 家实验室的 3 条认可范围记录

关键参数

标准

标准编号

PN-EN 16155:2012

标准名称（波兰语）

Artykuły żywnościowe — Oznaczanie sukralozy — Metoda wysokosprawnej chromatografii cieczowej

标准名称（英语）

Foodstuffs — Determination of sucralose — High performance liquid chromatographic method

分步操作程序

1. 均质化

   搅拌、粉碎、口香糖深冷（6.1）。PN-EN 16155:2012——无撤销标注（PKN，03.10.2026）。

2. 样品溶液

   约 5 g 定容至 50 ml；不完全溶解样品——40–60 °C 处理 30 min，含蛋白质样品加卡雷兹溶液（6.2.1、6.2.2）。

3. 固相萃取

   C18：活化、上样 5 ml、水洗、洗脱至 10 ml、过滤（6.2.3）。

4. HPLC

   RP-18，35 °C，RI 30 °C，约 1.2 ml/min；按保留时间和加标鉴定（6.3、6.4）。

5. 结果

   (R − a) · V / (b · m)，mg/kg 或 mg/l，修约至整数（7）。

所需设备与仪器

试剂、培养基与耗材

职业健康与安全

• 所读部分未包含单独的安全要求；使用甲醇和卡雷兹溶液（亚铁氰化钾、硝酸锌）（4）

常见问题