💊 药物溶出度试验
用 USP 装置（转篮、桨法、流通池）在体外考察片剂和胶囊中活性成分的释放。生物等效性的关键研究。
要点速览
- 标准: Ph. Eur. 2.9.3 (Farmakopea Europejska, 11. wydanie)
- 类别: 制药与化妆品
- 操作步骤数: 10
- 各步骤合计时间: 1 小时 1 分钟
- 介质温度: 37,0 ± 0,5°C
- 介质体积: 500–1000 mL（最常用 900 mL）
- 搅拌转速: 50–100 rpm（桨法）、100 rpm（转篮）
概述
溶出度试验是最重要的药物分析试验之一，用于测定口服固体制剂（片剂、胶囊、颗粒）在体外释放活性成分的速率和程度。《欧洲药典》（Ph. Eur.）2.9.3 章规定了装置、试验条件和验收判据。
该试验在药品质量控制中至关重要 — 溶出曲线与药物体内生物利用度相关。在药品注册过程中，需用溶出度试验证明仿制药与原研药的生物等效性。在例行质量控制中，每批生产均需进行。
药典规定了 4 种主要装置：装置 1（转篮）、装置 2（桨法）、装置 3（往复筒）和装置 4（流通池）。装置 1 和 2 最为常用。溶出介质（通常为 500–1000 mL 规定 pH 的缓冲液）维持在 37,0 ± 0,5°C，以模拟胃肠道条件。
Ph. Eur. 2.9.3、USP <711> 和 JP 6.10 的结果在 ICH 区域内互认，便于全球药品注册。该试验已由 ICH Q4B 附件 7 实现国际协调。
方法原理
将片剂或胶囊置于装有溶出介质、温度受控（37°C）的溶出杯中，以规定转速搅拌（转篮或桨）。在规定时间点取介质样品，过滤后用分光光度法（UV-Vis）或色谱法（HPLC）测定活性成分浓度。结果以药物释放百分率随时间的变化表示。单阶段试验至少需 6 个溶出杯（剂量单位）。
应用领域
- 每批生产的片剂和胶囊质量控制
- 仿制药生物等效性研究（与参比制剂比较）
- 制剂开发 — 处方和工艺优化
- 稳定性研究 — 溶出曲线随时间的变化
- 溶出曲线比较（f1/f2 相似因子）
- 缓控释片剂的溶出度试验
关键参数
| 参数 | 数值 |
|---|---|
| 介质温度 | 37,0 ± 0,5°C |
| 介质体积 | 500–1000 mL（最常用 900 mL） |
| 搅拌转速 | 50–100 rpm（桨法）、100 rpm（转篮） |
| 溶出杯数量 | 6（S1）、12（S2）、24（S3）— 验收阶段 |
| 验收判据（S1） | 规定时间点 6 个单位各 ≥ Q + 5% |
| 溶出介质 | pH 1,2（HCl）、pH 4,5（乙酸盐）、pH 6,8（磷酸盐）、水 |
标准
- 标准编号
- Ph. Eur. 2.9.3 (Farmakopea Europejska, 11. wydanie)
- 标准名称（波兰语）
- Test rozpuszczalności stałych postaci leku
- 标准名称（英语）
- Dissolution test for solid dosage forms
分步操作程序
-
介质配制
按药品各论配制溶出介质（pH 1,2 / 4,5 / 6,8 或其他）。真空或超声脱气。
-
溶出杯注液
向 6 个溶出杯中注入规定体积的介质（通常 900 mL）。置于溶出仪中并加热至 37,0°C。
-
温度核查
用经校准的温度计核查每个杯中介质的温度。公差 ±0,5°C。
-
投样
向每个杯中放入一片/一粒。装置 1 — 放入转篮。装置 2 — 直接投入杯中（若剂型上浮则加沉降篮）。
-
开始搅拌
以规定转速（如桨法 50 rpm）启动旋转。同时开始计时。
-
取样
在规定时间点（如 5、10、15、30、45、60 min）从每个杯中取介质样品（5–10 mL）。经 0,45 µm 过滤。
-
补加介质
用 37°C 的新鲜介质补足所取体积（或在计算中作体积修正）。
-
浓度测定
测定样品吸光度（UV-Vis）或进行 HPLC 分析。由校准曲线计算浓度。
-
释放百分率计算
计算释放剂量百分率：% =（C × V × 100）/（标示量）。计入所取体积的修正。
-
结果评定
将结果与验收判据（S1：各单位 ≥ Q+5%）比较。若不满足 — 转入 S2（6+6）或 S3（6+6+12）。
所需设备与仪器
| 设备 | 示例 | 参考价格 |
|---|---|---|
| 溶出仪 | Agilent 708-DS、SOTAX AT Xtend、ERWEKA DT 820、Distek Evolution 6300 | 80 000–250 000 PLN |
| 水浴 / 恒温装置 | 与溶出仪一体，稳定性 ±0,5°C | 随机配套 |
| UV-Vis 分光光度计 | Agilent Cary 60、Shimadzu UV-1900i、Thermo Evolution 201 | 25 000–80 000 PLN |
| HPLC（备选） | Agilent 1260 Infinity II、Waters Alliance e2695、Shimadzu Nexera | 150 000–350 000 PLN |
| 针头滤器 | PVDF/PTFE 0,45 µm，25 mm，Millipore、Whatman | 200–500 PLN / 100 只 |
| 溶出杯 | 1000 mL 玻璃杯配盖，符合 USP 规格 | 300–800 PLN / 只 |
试剂、培养基与耗材
| 试剂 | CAS | 详情 |
|---|---|---|
| 盐酸 0,1 mol/L（pH 1,2） | 7647-01-0 | 模拟胃液的介质，不含酶 |
| 乙酸盐缓冲液 pH 4,5 | 64-19-7 | 乙酸 + 乙酸钠，按 Ph. Eur. |
| 磷酸盐缓冲液 pH 6,8 | 7558-80-7 | 模拟小肠条件，KH₂PO₄ + NaOH |
| 聚山梨酯 80（吐温 80） | 9005-65-6 | 表面活性剂，用于难溶性成分（介质中加 0,1–2%） |
| 对照品 | — | 纯度已知的活性成分标准品，用于绘制校准曲线 |
| 纯化水 | — | 符合 Ph. Eur.（20°C 时电导率 ≤ 4,3 µS/cm），作介质或溶剂 |
职业健康与安全
- 0,1 mol/L 盐酸 — 腐蚀性物质，须戴手套和护目镜
- 37°C 温度 — 介质溅出时有烫伤风险
- 玻璃溶出杯 — 搬运时须小心（注满后约 1 kg）
- 接触活性成分 — 须采取相应防护（实验服、手套）
- 真空脱气 — 不得超过真空容器的允许参数
常见问题
该检测依据哪项标准？
该检测依据的标准为 Ph. Eur. 2.9.3 (Farmakopea Europejska, 11. wydanie) — 《Dissolution test for solid dosage forms》。
该方法的原理是什么？
将片剂或胶囊置于装有溶出介质、温度受控（37°C）的溶出杯中，以规定转速搅拌（转篮或桨）。在规定时间点取介质样品，过滤后用分光光度法（UV-Vis）或色谱法（HPLC）测定活性成分浓度。
测量范围和准确度是多少？
介质温度：37,0 ± 0,5°C；介质体积：500–1000 mL（最常用 900 mL）；搅拌转速：50–100 rpm（桨法）、100 rpm（转篮）；溶出杯数量：6（S1）、12（S2）、24（S3）— 验收阶段。
完成检测需要多长时间？
各步骤所列时间合计约为 1 小时 1 分钟。整个程序共 10 个步骤。
需要哪些设备？
溶出仪、水浴 / 恒温装置、UV-Vis 分光光度计、HPLC（备选）、针头滤器、溶出杯。核心仪器的参考价格（溶出仪）：80 000–250 000 PLN。
该检测用于哪些场景？
每批生产的片剂和胶囊质量控制；仿制药生物等效性研究（与参比制剂比较）；制剂开发 — 处方和工艺优化；稳定性研究 — 溶出曲线随时间的变化；溶出曲线比较（f1/f2 相似因子）；缓控释片剂的溶出度试验。
需要采取哪些安全防护措施？
0,1 mol/L 盐酸 — 腐蚀性物质，须戴手套和护目镜；37°C 温度 — 介质溅出时有烫伤风险；玻璃溶出杯 — 搬运时须小心（注满后约 1 kg）；接触活性成分 — 须采取相应防护（实验服、手套）；真空脱气 — 不得超过真空容器的允许参数。
哪家实验室可以开展此项检测？
该检测由通过 ISO/IEC 17025 认可的实验室开展。在 LabCoda 上可按标准编号检索 Ph. Eur. 2.9.3。