🦠 单核细胞增生李斯特氏菌与李斯特氏菌属——按 PN-EN ISO 11290-1 进行检出

微生物学 PN-EN ISO 11290-1

概述

规模及其在系列中的位置。2026 年 9 月 22 日的测量：138 条记录，涉及 79 家实验室；按记录字符串的开头匹配为 135 条记录、77 家实验室。这是第 1 部分——检出方法（在规定的样品量中给出"检出 / 未检出"的答案）。计数方法（结果以 cfu/g 或 cfu/ml 表示）是单独的第 2 部分文件——在本库中另有专门条目。这两项检测回答的是两个不同的问题，彼此不能替代：在食品法规中，判定标准有时表述为 25 g 中不得检出，有时表述为数值限量。

状态（2026 年 9 月 22 日 PKN 卡片状态）。PN-EN ISO 11290-1:2017-07——现行有效，卡片无撤销批注。ICS 07.100.30，技术机构 KT 3（食品链微生物学），"采用：EN ISO 11290-1:2017 [IDT]、ISO 11290-1:2017 [IDT]"。其代替 PN-EN ISO 11290-1:1999（波兰文版）及其修改单 PN-EN ISO 11290-1:1999/A1:2005。

两个语言版本——相隔三年半。PKN 目录中该版本有两张卡片： • 英文版——2017 年 7 月 18 日发布，50 页； • 波兰文版——2021 年 1 月 7 日发布，42 页。 上一版（1999 年）于 2017 年 7 月 18 日撤销，即英文版问世之日。在三年半的时间里，现行版本在波兰标准体系中只有英文文本——此后才补上波兰文版。这一机制在任何标准上都值得记住：今天没有波兰文版并不意味着以后也不会有，而它的出现既不改变标准编号，也不改变版本日期。波兰文版卡片上的发布日期（2021 年 1 月 7 日）并不是该标准进入体系的日期。

2017 年版改变了什么——在适用范围中即可看到的三点。1999 年版描述的是"检出单核细胞增生李斯特氏菌的水平法"，适用于食品和饲料。现行版本给出的方法： • 用于检出 L. monocytogenes 以及检出李斯特氏菌属（包括 L. monocytogenes）——因此增加了对整个属的检测，而不仅是单一菌种； • 适用于供人食用和供动物饲喂的产品，以及在食品生产和流通区域采集的环境样品——增加了生产线的涂抹样品，这是 1999 年版所不涵盖的； • 并附有保留：某些另行描述的李斯特氏菌菌种可能无法用本方法检出或确认。 最后这条保留在标准中写得很明确，对"李斯特氏菌属未检出"这一结果具有意义：这句话并不是说样品中没有任何李斯特氏菌，而是说本方法未检出它所能检出的那些。

为什么环境涂抹样品在这项标准中很重要。单核细胞增生李斯特氏菌会在工厂内长期存在——在地漏、地面和设备中——并由此进入产品。将环境样品纳入标准适用范围，意味着对生产线的检测可以采用标准化并经认可的方法，而不只是内部程序。这在认可范围中可以直接看到：有单独的记录其检测对象为"食品生产和流通区域的环境样品：- 涂抹样品"。

认可范围中显示的内容。方法："单核细胞增生李斯特氏菌的检出"（79 条），附加技术"培养法并经生化确认"（12 条），"李斯特氏菌属的检出"（9 条 + 3 条附技术），"单核细胞增生李斯特氏菌及其他李斯特氏菌属的检出"（5 条），两项检出在同一行中分别列出（4 条）。由此可见，2017 年的范围扩展确实进入了认可范围：实验室既认可菌种，也认可菌属。 检测对象有时写为单一基质（"肉与肉制品"），有时写为带脚注的"食品"，有时写为十几个类别的长列表——从肉、奶到香草、香辛料和饮料。该方法是水平法，即设计上就适用于多种基质，认可时也是如此。

记录形式——八种变体，其中一种具有误导性。该标准出现为："PN-EN ISO 11290-1:2017-07"（112 条）、不带年份的"PN-EN ISO 11290-1"（18 条）、"PN-EN ISO 11290-1 4)"和"PN-EN ISO 11290-1 2)"——将脚注编号粘连在代号之后（各 2 条）、多出一个连字符的"PN-EN ISO-11290-1:2017-07"（1 条）、冒号后带空格的"PN-EN ISO 11290-1: 2017-07"（1 条）、带短破折号的"PN–EN ISO 11290-1:2017-07"（1 条），以及连字符后带空格的"PN- EN ISO 11290-1:2017-07"（1 条）。 粘连脚注的写法（"11290-1 4)"）比较特殊：该数字并不属于标准代号，而属于范围表中的注释，在机器读取范围时却会成为编号的一部分。而对于 18 条不带年份的记录，则须另行确定其所指版本——1999 年版自 2017 年 7 月 18 日起已撤销。

本文未能解决的问题。我们没有标准文本——说明来自 PKN 目录卡上的范围描述（1999 年版和 2017 年版两种语言版本）以及对认可范围的测量。因此我们并不知道：增菌培养基和选择性培养基的组成（包括半选择性的第一次增菌阶段）、培养的时间和温度、试样的取样量、分离株的确认方式以及判读标准。我们同样未能确定 2017 年版是否发布过修改单（Amd）——在 PKN 目录中只找到 1999 年版的修改单 A1:2005。

方法原理

本方法为培养法且分多个阶段：将称取的样品悬浮于具有半选择性作用的增菌培养基中培养，随后转接至选择性增菌培养基；再由此划线接种于两种固体选择性培养基。对形态典型的菌落进行确认试验，以在菌种水平（L. monocytogenes）或菌属水平（Listeria spp.）作出判定。结果表述为在规定的样品质量或体积中检出或未检出——而不是菌落数。

应用领域

• 即食食品针对安全判定标准（25 g 中不得检出）的检测
• 饲料及动物饲喂用原料的检测
• 生产环境监测——食品企业生产线、地面和地漏的涂抹样品
• HACCP 体系及生产者采样计划框架下的检测
• 流行病学调查——查明企业内污染源

关键参数

标准

标准编号

PN-EN ISO 11290-1:2017-07 (wersje angielska i polska; wprowadza EN ISO 11290-1:2017 [IDT] i ISO 11290-1:2017 [IDT])

标准名称（波兰语）

Mikrobiologia łańcucha żywnościowego — Horyzontalna metoda wykrywania i oznaczania liczby Listeria monocytogenes oraz Listeria spp. — Część 1: Metoda wykrywania

标准名称（英语）

Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 1: Detection method

分步操作程序

1. 确定委托事项：检出还是计数

   本标准回答的是在规定样品量中"有没有"的问题。若判定标准要求以 cfu/g 表示的数值，则需要该系列的第 2 部分，而不是本标准。

2. 确定检测的是菌种还是菌属

   2017 年版涵盖 L. monocytogenes 与李斯特氏菌属的检出。这是两个不同的结果；在认可范围中它们有时列为不同的方法，且未必同时获得认可。

3. 采样——产品或生产环境

   标准涵盖供人食用的产品、供动物饲喂的产品以及来自生产和流通区域的环境样品。生产线涂抹样品所依据的标准与产品相同。

4. 在半选择性培养基中进行第一次增菌

   复苏受损细胞的阶段——对经加工、冷冻和热处理的食品尤为重要，其中的细菌可能已受损但仍具增殖能力。

5. 在选择性培养基中进行第二次增菌

   在划线接种至固体培养基之前，进一步限制伴随菌群。

6. 划线接种于两种固体选择性培养基并判读

   标准规定使用两种固体培养基；选取典型菌落进行确认。判读条件由标准给出。

7. 分离株的确认

   确认用以判定分离株是 L. monocytogenes 还是其他李斯特氏菌属。在认可范围中，这一阶段有时称为"生化确认"。

8. 结果的报告与保留说明

   结果以在规定质量或体积中检出或未检出的形式报告。对于涉及菌属的结果，应记住标准适用范围中的保留：某些另行描述的李斯特氏菌菌种可能无法用本方法检出或确认。

所需设备与仪器

试剂、培养基与耗材

职业健康与安全

• "未检出"的结果只针对规定的样品量以及本方法所能检出的对象——并不是对整批产品不含细菌的判定
• 检出（第 1 部分）与计数（第 2 部分）是两项不同的检测；法规中的判定标准指明需要哪一项
• 认可范围可能只涵盖 L. monocytogenes 的检出而不涵盖李斯特氏菌属的检出，或者相反——须核查方法名称，而不能只看标准编号
• 不带年份的引用无法指明版本；1999 年版自 2017 年 7 月 18 日起已撤销，且既不涵盖李斯特氏菌属，也不涵盖环境样品
• 现行版本的波兰文版迟至 2021 年 1 月 7 日才发布——更早实施该标准的实验室使用的是英文文本
• 在"PN-EN ISO 11290-1 4)"这一写法中，数字是范围表中的脚注编号，而不是标准代号的组成部分

常见问题