🍎 油脂茴香胺值——与对茴香胺反应，350 nm分光光度法
三句话速览
油脂的异辛烷溶液（25 ml中含0.4～4。该检测依据 PN-EN ISO 6885:2016-04；试样量：通常0.4～4.0 g，称准至1 mg，用异辛烷溶解并定容至25 ml。整个程序共 8 个步骤（合计约 2 分钟）；主要用于：评价植物油与动物脂肪中氧化的次级产物（醛类）、精炼油、煎炸油与鱼油的质量控制、研究油脂在煎炸、加热与贮存过程中的变化。
要点速览
- 标准: PN-EN ISO 6885:2016-04
- 类别: 食品化学
- 操作步骤数: 8
- 各步骤合计时间: 2 分钟
- 试样量: 通常0.4～4.0 g，称准至1 mg，用异辛烷溶解并定容至25 ml
- 试剂: 0.125 g对茴香胺溶于50 ml冰乙酸，当日配制；与异辛烷相比吸光度差 > 0.2时试剂不可用
- 反应: 5 ml溶液 + 1 ml试剂，23 ± 3 °C下避光8 min，总计10 ± 1 min后测定
概述
本标准规定了测定动植物油脂茴香胺值的方法，该值是所存在醛类（主要是α,β-不饱和醛，即油脂氧化的次级产物）数量的量度。茴香胺值为试验溶液在本标准条件下与对茴香胺反应后于10 mm比色皿中在350 nm处测得的吸光度增量的100倍；它是无量纲的，对应于100 ml溶剂与试剂混合液中1 g试样。乳与乳制品（以及由其提取的脂肪）不在适用范围内。第四版ISO 6885:2016代替2006年版。
与反映不稳定的氧化初级产物的过氧化值不同，茴香胺值表征氢过氧化物分解生成的醛与酮的含量，因此是评价油脂中氧化过程的良好指标。评价油脂氧化时，总氧化值很有帮助——Totox值 = 2·LOO + LA（过氧化值以meq O2/kg计）。在一篇关于食用油脂氧化稳定性的综述（Bromatologia i Chemia Toksykologiczna 2011）中，给出了煎炸过程中某种油的茴香胺值由1.2升至59.8、Totox值由3.91升至67.85的数据。
试样量（通常0.4～4.0 g）应依样品质量与分光光度计性能选取，使反应后溶液的吸光度处于0.2～0.8范围内；否则应改用其他试样量重新测定。水分含量超过0.10 %的样品用无水硫酸钠干燥（每10 g样品用1～2 g）。
方法原理
将称取的油脂在25 ml容量瓶中溶于异辛烷。从该溶液中取5 ml分别注入两支试管：一支加入1 ml冰乙酸（未反应溶液，吸光度A0），另一支加入1 ml茴香胺试剂（已反应溶液，A1）；第三支试管装5 ml异辛烷与1 ml试剂，作为空白（A2）。试管在23 ± 3 °C下避光放置8 min，随后2 min内将内容物转入干燥比色皿，自加入试剂起总反应时间10 ± 1 min时以异辛烷为参比于350 nm测定吸光度。茴香胺值：AV = 100·Q·V/m · [1.2·(A1 − A2 − A0)]，其中V = 25 ml，Q = 0.01 g/ml，m为试样质量（g），1.2为校正加入1 ml试剂所致稀释的系数。结果保留一位小数。在0～100范围内，重复性r = 0.034·AV + 0.31，再现性R = 0.19·AV + 1.41。
应用领域
- 评价植物油与动物脂肪中氧化的次级产物（醛类）
- 精炼油、煎炸油与鱼油的质量控制
- 研究油脂在煎炸、加热与贮存过程中的变化
- 与过氧化值一并计算Totox值
- 科研中油脂氧化稳定性的评价
关键参数
| 参数 | 数值 |
|---|---|
| 试样量 | 通常0.4～4.0 g，称准至1 mg，用异辛烷溶解并定容至25 ml |
| 试剂 | 0.125 g对茴香胺溶于50 ml冰乙酸，当日配制；与异辛烷相比吸光度差 > 0.2时试剂不可用 |
| 反应 | 5 ml溶液 + 1 ml试剂，23 ± 3 °C下避光8 min，总计10 ± 1 min后测定 |
| 测定 | 350 nm，10 mm比色皿，以异辛烷为参比；吸光度A1应在0.2～0.8范围内，空白A2 ≤ 0.2 |
| 精密度（AV 0～100） | r = 0.034·AV + 0.31；R = 0.19·AV + 1.41 |
| 结果 | 保留一位小数；Totox = 2·LOO + AV |
标准
- 标准编号
- PN-EN ISO 6885:2016-04
- 标准名称（波兰语）
- Oleje i tłuszcze roślinne oraz zwierzęce — Oznaczanie liczby anizydynowej
- 标准名称（英语）
- Animal and vegetable fats and oils — Determination of anisidine value
分步操作程序
-
试样制备
按ISO 661制备试样。若水分含量超过0.10 %，加入无水硫酸钠（每10 g充分混匀的样品用1～2 g；固体脂肪的温度不超过其熔点以上10 °C），混匀并过滤，同时避免水分进入。
-
茴香胺试剂
使用当日将0.125 g对茴香胺溶于50 ml容量瓶中的冰乙酸并定容，注意避强光。以异辛烷为参比检查吸光度；差值超过0.2时弃用该试剂。剩余试剂当日销毁。
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试样溶液
在25 ml容量瓶中称取适量试样（通常0.4～4.0 g），准确至1 mg；固体试样先加热至熔点以上10 °C。用5～10 ml异辛烷溶解并定容。
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未反应溶液（A0）
用移液管取5 ml试样溶液至试管中，加入1 ml冰乙酸，塞紧并振摇；于23 ± 3 °C下避光放置8 min，2 min内转入洁净干燥的比色皿。
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已反应溶液（A1）
向5 ml试样溶液中用移液管加入1 ml茴香胺试剂，振摇，于23 ± 3 °C下避光放置8 min，转入比色皿；自加入试剂起总反应时间10 ± 1 min时测定。
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空白（A2）
向5 ml异辛烷中加入1 ml茴香胺试剂，按第5步操作。
-
测定
用异辛烷在350 nm处调零，并以异辛烷为参比测定吸光度A1、A0与A2。若A1不在0.2～0.8范围内，改用其他试样量重新测定；若A2超过0.2，应提纯对茴香胺并配制新鲜试剂。
-
计算与检验报告
取V = 25 ml与Q = 0.01 g/ml，AV = 100·Q·V/m · [1.2·(A1 − A2 − A0)]；保留一位小数。可选计算Totox = 2·LOO + AV。检验报告中给出：试样标识、取样方式、对ISO 6885的引用、偏离情况与结果。
所需设备与仪器
| 设备 | 示例 | 参考价格 |
|---|---|---|
| 紫外分光光度计 | 单光束或双光束，可在350 nm测定；10 mm比色皿（双光束仪器需配对的比色皿） | — |
| 25 ml容量瓶 | 用于试样的异辛烷溶液 | — |
| 10 ml试管 | 带磨口玻璃塞 | — |
| 1 ml与5 ml移液管 | 配吸液装置（安全移液） | — |
| 分析天平 | 读数1 mg | — |
试剂、培养基与耗材
| 试剂 | CAS | 详情 |
|---|---|---|
| 异辛烷（2,2,4-三甲基戊烷） | 540-84-1 | 在300～380 nm范围内以水为参比的吸光度不大于0.01 |
| 对茴香胺（4-甲氧基苯胺） | 104-94-9 | 无水的乳白色结晶，装于深色瓶中于0～4 °C保存；呈灰色或粉红色时须提纯（4 g溶于100 ml 75 °C的水中，加0.5 g亚硫酸钠与2 g活性炭，于0 °C结晶至少4 h） |
| 冰乙酸 | 64-19-7 | 含水量不大于0.1 %（质量分数） |
| 无水硫酸钠 | 7757-82-6 | 用于干燥水分含量 > 0.10 %的样品：每10 g样品用1～2 g |
职业健康与安全
- 对茴香胺有毒——避免接触皮肤，戴手套并在通风橱内操作，试剂配制量应尽可能少，剩余试剂当日销毁
- 异辛烷易燃，冰乙酸有腐蚀性——远离火源，佩戴护目镜
- 移液只能使用吸液装置
常见问题
该检测依据哪项标准？
该检测依据的标准为 PN-EN ISO 6885:2016-04 — 《Animal and vegetable fats and oils — Determination of anisidine value》。
该方法的原理是什么？
将称取的油脂在25 ml容量瓶中溶于异辛烷。从该溶液中取5 ml分别注入两支试管：一支加入1 ml冰乙酸（未反应溶液，吸光度A0），另一支加入1 ml茴香胺试剂（已反应溶液，A1）；第三支试管装5 ml异辛烷与1 ml试剂，作为空白（A2）。
测量范围和准确度是多少？
试样量：通常0.4～4.0 g，称准至1 mg，用异辛烷溶解并定容至25 ml；试剂：0.125 g对茴香胺溶于50 ml冰乙酸，当日配制；与异辛烷相比吸光度差 > 0.2时试剂不可用；反应：5 ml溶液 + 1 ml试剂，23 ± 3 °C下避光8 min，总计10 ± 1 min后测定；测定：350 nm，10 mm比色皿，以异辛烷为参比；吸光度A1应在0.2～0.8范围内，空白A2 ≤ 0.2。
完成检测需要多长时间？
各步骤所列时间合计约为 2 分钟。整个程序共 8 个步骤。
需要哪些设备？
紫外分光光度计、25 ml容量瓶、10 ml试管、1 ml与5 ml移液管、分析天平。
该检测用于哪些场景？
评价植物油与动物脂肪中氧化的次级产物（醛类）；精炼油、煎炸油与鱼油的质量控制；研究油脂在煎炸、加热与贮存过程中的变化；与过氧化值一并计算Totox值；科研中油脂氧化稳定性的评价。
需要采取哪些安全防护措施？
对茴香胺有毒——避免接触皮肤，戴手套并在通风橱内操作，试剂配制量应尽可能少，剩余试剂当日销毁；异辛烷易燃，冰乙酸有腐蚀性——远离火源，佩戴护目镜；移液只能使用吸液装置。
哪家实验室可以开展此项检测？
该检测由通过 ISO/IEC 17025 认可的实验室开展。在 LabCoda 上可按标准编号检索 PN-EN ISO 6885。