🦠 污水污泥中肠道寄生虫(蛔虫、鞭虫、弓蛔虫)的活卵——经振荡、离心洗涤和漂浮分离,再作显微镜检查

微生物 PN-Z-19005

三句话速览

用于农业施用和复垦的污泥的参比方法。活卵用振荡或搅拌、借助离心的洗涤以及漂浮,从有代表性的污泥样品中分离出来,然后进行显微镜检查。该检测依据 PN-Z-19005:2018-10;所测指标:每 1 kg 污泥干物质中蛔虫属、鞭虫属、弓蛔虫属活卵的总数。整个程序共 7 个步骤;主要用于:污水污泥在交付农业利用之前——决定该批次能否放行的检验、用于农用地复垦的污泥——同样是每公斤干物质零个活卵的门槛、污泥卫生化处理(加石灰、堆肥、高温消化)效果的控制。

要点速览

  • 标准: PN-Z-19005:2018-10
  • 类别: 微生物
  • 操作步骤数: 7
  • 所测指标: 每 1 kg 污泥干物质中蛔虫属、鞭虫属、弓蛔虫属活卵的总数
  • 容许值: 农业施用和农用地复垦的污泥为 0 个/kg 干物质
  • 分离的各阶段: 振荡或搅拌 → 借助离心的洗涤 → 漂浮 → 显微镜检查;自 2026 年 1 月 14 日起的附件文本还增加了漂浮液密度不小于 1.2 g/cm³、虫卵在 26–28 °C 下至少孵育 14 天,以及虫卵活性的评定

概述

这项测定决定污水污泥是否准许作农业利用,因此是污泥管理中最重要的检验之一。关于城市污水污泥的条例指出,参比方法是:以振荡或搅拌、借助离心的洗涤以及漂浮,从有代表性的污泥样品中分离肠道寄生虫的活卵,然后进行显微镜检查。所检验的指标是每公斤污泥干物质中蛔虫属、鞭虫属和弓蛔虫属活卵的总数。

限值很严:对于在农业中施用以及用于农用地复垦的污泥,活卵的容许数量为每公斤干物质零个。这意味着在所检样品中哪怕出现一个活卵,也排除了该批污泥的农业利用。按参比方法检验的频次取决于污水处理厂的负荷,以人口当量表示。

为什么恰好是这三个属:人蛔虫和猪蛔虫(Ascaris lumbricoides、Ascaris suum)以及鞭虫(Trichuris trichiura)在污泥的卫生评价中具有诊断价值;感染经消化道发生,而蛔虫病在大量感染时可导致肠梗阻。这些线虫的卵格外耐久:在土壤中的存活时间据称为 240–294 天至若干年,并保持感染能力,而物理和化学方法消灭它们的效果很差。已经查明活卵能在 50–60 °C 的堆肥堆中存活,甚至在堆体某些层位以 60–70 °C 堆肥三十天后蛔虫卵仍有发育能力。这就说明了为什么污泥的卫生化处理并不免除这项检验。

限于三个属的线虫,并不意味着其他寄生虫不存在——人可以是约一百五十种寄生蠕虫的宿主;这项指标虽是约定的,但却是经过检验的污泥卫生状况的量度。在实验室实践中也曾采用卢布林农村医学研究所的方法,认为每公斤含侵袭性虫卵十个及以上的污泥在流行病学上属于危险。

测定的关键环节:样品的代表性(污泥不均匀,而结果是是非式的)、有机物含量高时漂浮的效果,以及在显微镜下区分活卵与死卵——后者需要熟练,是各实验室之间结果分歧最常见的地方。关于法规文本的说明:以上描述对应的是 2015 年文本中的参比方法。自 2026 年 1 月 14 日起施行的附件文本多出三项执行参数:在密度不小于 1.2 g/cm³ 的漂浮液中进行漂浮、把分离出的虫卵在 26–28 °C 下至少孵育 14 天,以及在显微镜检查之后评定虫卵的活性。今天工作的实验室适用新的文本。

方法原理

从有代表性的污泥样品中分离肠道寄生虫活卵,分三个相继的阶段进行:振荡或搅拌,使虫卵从污泥固相中释放出来;借助离心的洗涤,把它们与细小颗粒和有机物分开;以及在适当密度溶液中的漂浮,虫卵进入表层相,较重的颗粒沉下。所得材料在显微镜下观察,对蛔虫属、鞭虫属和弓蛔虫属的虫卵计数和区分,并评定其活性。结果以每公斤污泥干物质中活卵的总数给出,因此同时测定干物质(PN-EN 15934 或 PN-EN 12880)并据以换算结果。对于用于农业施用和农用地复垦的污泥,容许值为每公斤干物质零个活卵。关于法规文本的说明:以上描述对应的是 2015 年文本中的参比方法。自 2026 年 1 月 14 日起施行的附件文本多出三项执行参数:在密度不小于 1.2 g/cm³ 的漂浮液中进行漂浮、把分离出的虫卵在 26–28 °C 下至少孵育 14 天,以及在显微镜检查之后评定虫卵的活性。今天工作的实验室适用新的文本。

应用领域

关键参数

参数数值
所测指标每 1 kg 污泥干物质中蛔虫属、鞭虫属、弓蛔虫属活卵的总数
容许值农业施用和农用地复垦的污泥为 0 个/kg 干物质
分离的各阶段振荡或搅拌 → 借助离心的洗涤 → 漂浮 → 显微镜检查;自 2026 年 1 月 14 日起的附件文本还增加了漂浮液密度不小于 1.2 g/cm³、虫卵在 26–28 °C 下至少孵育 14 天,以及虫卵活性的评定
同时进行的测定干物质(PN-EN 15934 / PN-EN 12880)——结果换算到每公斤干物质
虫卵的耐久性在土壤中存活 240–294 天至若干年;在 50–60 °C 的堆肥堆中能够存活
关键环节在显微镜下区分活卵与死卵——各实验室之间分歧的主要来源

标准

标准编号
PN-Z-19005:2018-10
标准名称(波兰语)
Jakość gleby — Oznaczanie liczby żywych jaj pasożytów jelitowych Ascaris sp., Trichuris sp., Toxocara sp. w komunalnych osadach ściekowych
标准名称(英语)
Soil quality — Determination of the number of viable eggs of intestinal parasites Ascaris sp., Trichuris sp., Toxocara sp. in municipal sewage sludge

分步操作程序

  1. 采取有代表性的样品

    采取对整批污泥有代表性的样品——在结果是是非式的情况下,不具代表性的样品是最大的风险。同时采取用于测定干物质的材料。

  2. 虫卵的释放

    对样品进行振荡或搅拌,以释放与污泥固相结合的虫卵。

  3. 借助离心的洗涤

    借助离心洗涤材料,把虫卵与细小矿物颗粒和有机物分开。按程序反复进行,直至得到清晰可辨的沉淀。

  4. 漂浮

    在适当密度的溶液中进行漂浮——虫卵进入表层相,较重的杂质沉下。取出表层相供显微镜检查。按自 2026 年 1 月 14 日起的附件文本,漂浮液的密度应不小于 1.2 g/cm³,而分离出的虫卵在显微镜检查之前要在 26–28 °C 下至少孵育 14 天。

  5. 显微镜检查

    在显微镜下观察制片,区分蛔虫属、鞭虫属和弓蛔虫属的虫卵,并评定其活性。对活卵计数。

  6. 换算到干物质

    利用同时测定的干物质,把结果换算为每公斤污泥干物质中活卵的总数。

  7. 评定与检验报告

    把结果与容许值比较:对于农业施用和农用地复垦的污泥,容许值为每公斤干物质零个活卵。在检验报告中给出所检出虫卵的数量和属别,以及据以换算结果的干物质。

所需设备与仪器

设备示例参考价格
显微镜——按参比方法,显微镜检查是测定的最后一步区分蛔虫、鞭虫和弓蛔虫的虫卵并评定活性
实验室离心机借助离心的洗涤——参比方法的一个阶段
振荡器或搅拌器振荡或搅拌——参比方法的第一个阶段
漂浮用器皿漂浮——参比方法的第三个阶段
105 °C 干燥箱和分析天平同时测定干物质(PN-EN 15934)以换算结果

试剂、培养基与耗材

试剂CAS详情
漂浮液参比方法把漂浮列为分离的一个阶段;溶液的种类,条例和所引用的方法都未加规定——由实验室的程序选定;密度要到自 2026 年 1 月 14 日起施行的附件文本才给出:不小于 1.2 g/cm³(本条目其余部分所描述的 2015 年文本并未给出密度)
洗涤用水借助离心的洗涤——参比方法的一个阶段
工位和玻璃器皿用消毒剂感染性材料——每批之后消毒

职业健康与安全

常见问题

该检测依据哪项标准?

该检测依据的标准为 PN-Z-19005:2018-10 — 《Soil quality — Determination of the number of viable eggs of intestinal parasites Ascaris sp., Trichuris sp., Toxocara sp. in municipal sewage sludge》。

该方法的原理是什么?

从有代表性的污泥样品中分离肠道寄生虫活卵,分三个相继的阶段进行:振荡或搅拌,使虫卵从污泥固相中释放出来;借助离心的洗涤,把它们与细小颗粒和有机物分开;以及在适当密度溶液中的漂浮,虫卵进入表层相,较重的颗粒沉下。所得材料在显微镜下观察,对蛔虫属、鞭虫属和弓蛔虫属的虫卵计数和区分,并评定其活性。

测量范围和准确度是多少?

所测指标:每 1 kg 污泥干物质中蛔虫属、鞭虫属、弓蛔虫属活卵的总数;容许值:农业施用和农用地复垦的污泥为 0 个/kg 干物质;分离的各阶段:振荡或搅拌 → 借助离心的洗涤 → 漂浮 → 显微镜检查;自 2026 年 1 月 14 日起的附件文本还增加了漂浮液密度不小于 1.2 g/cm³、虫卵在 26–28 °C 下至少孵育 14 天,以及虫卵活性的评定;同时进行的测定:干物质(PN-EN 15934 / PN-EN 12880)——结果换算到每公斤干物质。

完成检测需要多长时间?

整个程序共 7 个步骤。标准未对每个步骤给出时长——实际用时取决于实验室自身的操作程序。

需要哪些设备?

显微镜——按参比方法,显微镜检查是测定的最后一步、实验室离心机、振荡器或搅拌器、漂浮用器皿、105 °C 干燥箱和分析天平。

该检测用于哪些场景?

污水污泥在交付农业利用之前——决定该批次能否放行的检验;用于农用地复垦的污泥——同样是每公斤干物质零个活卵的门槛;污泥卫生化处理(加石灰、堆肥、高温消化)效果的控制;拟施用污泥的土地的卫生评价;污水处理厂的卫生监测——频次取决于人口当量。

需要采取哪些安全防护措施?

污水污泥和寄生虫卵是感染性材料——戴手套、穿工作服操作,双手不得接触面部,每批之后对工位消毒。;蛔虫卵格外顽强——普通消毒剂和堆肥温度并不保证能消灭它们;玻璃器皿和器具须按程序灭菌。;不得在配制培养基或进行其他洁净度检验的工位上做这项检验。;漂浮后的废物按感染性材料处理——未经消毒不得倒入下水道。;吸取表层相时避免产生气溶胶。

哪家实验室可以开展此项检测?

该检测由通过 ISO/IEC 17025 认可的实验室开展。在 LabCoda 上可按标准编号检索 PN-Z-19005。

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