🍎 以二硫化碳表示的低脂食品中二硫代氨基甲酸盐类杀菌剂和福美双（二硫化秋兰姆）低含量残留总量的测定——测试份（至多 200 g，婴儿食品 400 g）与氯化亚锡盐酸溶液一起煮沸 30 min，释放的 CS2 经氢氧化钠和硫酸洗气管净化后，在甲醇氢氧化钾溶液中以黄原酸钾形式吸收，于 302 nm 测定其吸光度并在 272 和 332 nm 处校正；校准曲线 1–40 µg CS2，PN-EN 12396-3

食品化学 PN-EN 12396-3

概述

本标准涵盖的内容。标准正文我们读的是 iTeh 的 SIST EN 12396-3:2001 样本（EN 12396-3:2000 英文文本，扫描件）：从标题页经目录、前言和第 1–7 章至第 7 页 8.4.3（光谱测量和吸光度校正方程 (1)）。样本之外的是结果表示（9）、确证试验（10）、精密度（11）、试验报告（12）、附录 A（精密度数据）和参考文献。

依据 EN 12396-3:2000 文本。本标准由 CEN/TC 275“食品分析——横向方法”编制，秘书处由 DIN 承担；CEN 于 08.04.2000 批准，各国最迟应于 2000 年 11 月采用。EN 12396 分三部分：第 1 部分——分光光度法，第 2 部分——气相色谱法，第 3 部分——紫外光谱黄原酸盐法。范围（1）：以黄原酸盐形式测定二硫代氨基甲酸盐类和二硫化秋兰姆类杀菌剂低含量残留的紫外光谱法；这些化合物在规定条件下释放二硫化碳（如代森锰锌、代森锰、丙森锌、福美双、代森锌）；该方法尤其适用于已设定较低最大残留限量的植物源食品；只能对整组进行定量，不鉴别单个化合物；最大残留限量（MRL）通常以二硫化碳表示。引用文件（2）：ISO 1750（农药通用名）、EN 12393-1:1998、EN 12396-1:1998、EN 12396-2:1998。原理（3）：样品与盐酸和氯化亚锡一起加热，使存在的二硫代氨基甲酸盐和/或二硫化秋兰姆释放二硫化碳；CS2 经蒸馏分离和净化，收集于甲醇氢氧化钾溶液中形成黄原酸钾；在 302 nm 处测定该产物吸光度并在 272 nm 和 332 nm 处进行基线校正，残留质量分数以每千克食品中二硫化碳的毫克数表示。试剂（4）：公认分析纯试剂，最好为农药残留分析级，蒸馏水或去离子水；应避免塑料和橡胶对水、溶剂和无机盐的污染——水和试剂的储存和操作仅用玻璃容器；二硫化碳纯度至少 99 %（–20 °C 下可稳定 2–3 年）、甲醇、浓盐酸（1.16 g/ml）、浓硫酸（1.84 g/ml）、100 g/l 氢氧化钠溶液、甲醇氢氧化钾溶液 I（28 g/l）和 II（56 g/l）、40 g/100 ml 氯化亚锡浓盐酸溶液、3.3 g/100 ml 氯化亚锡–盐酸工作溶液（20 ml 氯化亚锡溶液、20 ml 浓盐酸，再小心加入 200 ml 水）；CS2 储备液——将约 1 ml（约 1.25 g）二硫化碳加入含 40 ml 甲醇的 50 ml 容量瓶，加入前后称量精确至 10 mg，用甲醇定容；标准溶液——1 : 25 和 1 : 100 稀释，1 ml ≈ 10 µg CS2；两者均为每条校准曲线新配。仪器（5）：彻底清洁的玻璃器皿（按 prEN 12393-1:1998 的 5.1 清洗）；分解和蒸馏装置（图 1）——1 l 或 2 l 三口圆底烧瓶或带三口接头的圆柱形烧瓶、滴液漏斗、进气管、上行李比希冷凝器和四支以球形磨口连接的吸收管，最后两支最好带 Widmer 螺旋；流量计；至少 450 W 的电加热套或带 Babo 漏斗的煤气灯；可在 270–350 nm 测量的光谱仪，配 1 cm 石英比色皿，最好为双光束；接在最后一支吸收管上的低真空泵或接在进气管上的加压氮气源。采样（6）：按一般推荐方法制备实验室样品，以获得具代表性的部分；根据注释，水果和蔬菜中农药残留官方控制的采样程序见指令 79/700/EEC。样品制备（7）：冷冻送达的样品在 –20 °C 下储存；新鲜样品尽可能在到达后立即分析，完全或大部分腐败的样品不予分析；只取最大残留限量所适用的部分，并记录去除的植物部位；如不能立即分析，样品在 0–5 °C 下储存不超过 2 天，更长时间储存则在 –20 °C 下深冻，分装为每份够一次分析的量；缩分应得到具代表性的部分（如四分法并取对角两份；小单元——充分混匀；大型果蔬——楔形切块，黄瓜——含每个单元外表面的横切片）；根据注释，植物部位表面的非内吸性二硫代氨基甲酸盐和二硫化秋兰姆残留分解迅速，在切碎样品中尤甚。测试份（7.2）：至多 200 g，称量精确至 ± 1 %；干扰分析的部分在称量后去除（如核果的果核），计算以原始测试份（含果核）质量为基础；测试份切块不得小于刚好能通过烧瓶瓶颈所需的程度，因为切得越碎残留越低；切后立即分析。步骤（8）：警告——许多二硫代氨基甲酸盐、二硫化秋兰姆和二硫化碳经多种暴露途径有毒，浓缩形式尤甚（参见生产商安全数据表）；某些溶剂的蒸气有毒，且易经皮肤吸收——使用有效的通风橱（8.1）。空白（8.2）：试剂空白和基质空白，以及在与最大残留限量相应水平下的加标回收试验，结果须令人满意；试剂空白在 302 nm 处相对 KOH 溶液 I 的吸光度须为零或接近零；根据注释，分析人员应在分析前充分掌握该方法，某些蔬菜（如十字花科）含有在本标准条件下释放 CS2 的天然化合物，可导致假阳性结果。校准曲线（8.3）：在十六个 10 ml 容量瓶中各加 5 ml KOH 溶液 II，每两个瓶分别加 0.1、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2 和 4 ml 标准溶液（1、2、4、8、12、16、20 和 40 µg CS2），用甲醇定容，静置 45 min，按 8.4.3 测量；曲线在 1–40 µg CS2 范围内须呈线性——否则用新配混合液重做；也可对 16 个值进行回归代替作图。装置准备（8.4.1）：第一支吸收管加 20 ml 氢氧化钠溶液，第二支加 20 ml 硫酸，第三和第四支（带 Widmer 螺旋）各加 8 ml KOH 溶液 I，用冰水冷却以避免甲醇损失；根据注释，第四支吸收管用于核查 CS2 是否被完全吸收；通过吸收管的氮气或空气流量约 150 ml/min。分解和蒸馏（8.4.2）：烧瓶中加入至多 200 g 测试份（婴儿食品 400 g），封闭装置避免 CS2 损失，经滴液漏斗加入 240 ml 氯化亚锡–盐酸溶液（体积大的物料如生菜可多加，使测试份完全浸没）；迅速加热至沸腾——尤其是深冻物料，应先将溶液加热至沸再小心加入——共沸腾 30 min；然后断开装 KOH 的吸收管并关闭气流。测量（8.4.3）：将第三和第四支吸收管的内容物分别转入 10 ml 容量瓶，用 KOH 溶液 I 冲洗并定容，15 min 后以 KOH 溶液 I 为参比，用 1 cm 比色皿在 272、302 和 332 nm 处测量第三支吸收管所得溶液；校正吸光度 A_corr = A302 − (A272 + A332)/2。

状态（截至 03.10.2026）。PKN 检索（检索词“PN-EN 12396-3”，03.10.2026）有一条结果：PN-EN 12396-3:2002（波兰文版，“Wprowadza: EN 12396-3:2000 [IDT]”），无废止注明。在 iTeh 目录中（读取于 03.10.2026），EN 12396-3:2000 状态为“Published”，阶段 90.93（确认标准的决定）。

多少家实验室、以何种形式（认可范围数据库副本，载入至 17.09.2026，读取于 03.10.2026）。编号 12396-3 出现在 5 家实验室的 5 条记录中：AB 492、AB 519、AB 1205、AB 1334、AB 1748。在 PCA 现行文件中（读取于 03.10.2026，版本从 26.11.2025 至 03.07.2026），该编号出现在 5 行中——每家一行；五份文件中每份的页码标记数等于 PDF 页数，无重复；检索 03.10.2026 从 BIP 下载的全部 1291 份 PCA 文件，未发现数据库副本以外的实验室（名录中有 17 家实验室在 BIP 上没有范围文件链接）。形式为“PN-EN 12396-3:2002”（AB 492、AB 519、AB 1205、AB 1748）和连字符后带空格的“PN-EN 12396- 3:2002”（AB 1334）。这些项目均未暂停。“实验室”选项卡（检索词“PN-EN 12396-3”）显示 4 家实验室——除编号带空格的 AB 1334 外全部——已于 03.10.2026 在 labcoda.pl 生产服务器上通过选项卡查询核实。

实验室检测什么（PCA 中的项目）。检测对象：植物源食品、农产品——高水分、高酸高水分、高淀粉和/或蛋白质且低水分低脂肪（AB 492）；植物源食品样品——高水分、高酸高水分、高淀粉和/或蛋白质且低蛋白质低脂肪（PCA 原文如此）——以及儿童谷物制品（AB 519）；植物源食品、高水分果蔬、高酸高水分水果、高淀粉和/或蛋白质且低水分低脂肪食品（AB 1205）；新鲜或冷冻果蔬（AB 1334）；食品（AB 1748，弹性认可范围内的项目）。特性：以 CS2 表示或折算为 CS2 的二硫代氨基甲酸盐残留（AB 492、AB 519——连同二硫化秋兰姆、AB 1334、AB 1748——“二硫代氨基甲酸盐（二硫化秋兰姆）”），二硫代氨基甲酸盐类农药残留（AB 1205）。范围：（0.01–0.80）mg/kg（AB 492）、（0.01–0.2）mg/kg CS2（AB 519）、（0.03–2.0）mg/kg（AB 1205）、（0.025–7.500）mg/kg（AB 1334）；AB 1748 未给出范围。技术：分光光度法（AB 492、AB 519、AB 1748）、紫外分光光度法（AB 1205、AB 1334）。

容易得到看似正确结果的环节。样品：表面残留分解迅速，切碎后尤甚——测试份切块不得细于烧瓶瓶颈所需，切后立即分析（7.1、7.2）。储存：0–5 °C 最多 2 天，更长时间只能分装深冻，每份供一次分析（7.1）。质量：计算以去除果核前的测试份质量为基础（7.2）。基质：十字花科蔬菜本身可能释放 CS2，产生假阳性（8.2，注 2）。玻璃器皿和试剂：仅用玻璃容器，不接触塑料和橡胶（4.1）。吸收：第四支吸收管核查 CS2 是否完全吸收；KOH 吸收管用冰水冷却（8.4.1）。校准：1–40 µg CS2 线性，每条曲线用新配标准（4.11、4.12、8.3）。结果：该方法给出以 CS2 计的组总量，不指明存在的是哪种化合物（1）。

我们未提供的内容。结果计算（9）、确证试验（10）、精密度数据（11，附录 A）和试验报告要求（12）我们没有读。我们不提供最大残留限量。

方法原理

食品测试份（至多 200 g）与氯化亚锡盐酸溶液一起煮沸 30 min，使二硫代氨基甲酸盐和二硫化秋兰姆释放二硫化碳。载气（约 150 ml/min）将 CS2 经冷凝器以及装氢氧化钠和硫酸的洗气管带入装有甲醇氢氧化钾的冷却吸收管，生成黄原酸钾。在 302 nm 处测定吸光度，于 272 和 332 nm 处进行基线校正，并对照 1–40 µg CS2 校准曲线；结果为以 mg CS2/kg 表示的残留总量。

应用领域

• 二硫代氨基甲酸盐类杀菌剂和二硫化秋兰姆（如代森锰锌、代森锰、丙森锌、福美双、代森锌）低含量残留，以 CS2 计总量（1）
• 已设定较低最大残留限量的植物源食品（1）；婴儿食品——测试份 400 g（8.4.2）
• 果蔬、高水分、高酸或高淀粉和蛋白质植物性食品、儿童谷物制品——PCA 中 5 家实验室认可范围内的项目

关键参数

标准

标准编号

PN-EN 12396-3:2002

标准名称（波兰语）

Żywność o niskiej zawartości tłuszczu — Oznaczanie pozostałości ditiokarbaminianów i disiarczku tiuramu — Część 3: Metoda ksantogenianowa z wykorzystaniem spektrometrii UV

标准名称（英语）

Non-fatty foods — Determination of dithiocarbamate and thiuram disulfide residues — Part 3: UV spectrometric xanthogenate method

分步操作程序

1. 样品和测试份

   取最大残留限量适用部分；0–5 °C 储存至多 2 天或 –20 °C；测试份至多 200 g，仅切至瓶颈大小，立即分析（7）。PN-EN 12396-3:2002 无废止注明（03.10.2026）。

2. 校准和空白

   KOH II 中 16 个 1–40 µg CS2 溶液，45 min，线性曲线；试剂和基质空白，最大残留限量水平回收（8.2、8.3）。

3. 装置准备

   吸收管中加 NaOH、H2SO4 和 2 × KOH I，冰冷却，气流约 150 ml/min（8.4.1）。

4. 分解和蒸馏

   测试份入瓶，经漏斗加 240 ml SnCl2–HCl，迅速沸腾，共 30 min（8.4.2）。

5. 测量

   第 3、4 支吸收管分别转入 10 ml 容量瓶，用 KOH I 定容，15 min 后在 272、302 和 332 nm 测吸光度，计算 A_corr（8.4.3）。

所需设备与仪器

试剂、培养基与耗材

职业健康与安全

• 二硫代氨基甲酸盐、二硫化秋兰姆和二硫化碳经多种暴露途径有毒，浓缩时尤甚——参见生产商安全数据表（8.1）
• 某些溶剂蒸气有毒且易经皮肤吸收——使用有效的通风橱（8.1）

常见问题