🦠 肉和肉制品中的厌氧芽孢菌和亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌——采用培养法检测存在与否，并进行生化（和显微镜）确认；根据 PKN 卡片，还包括某些菌种的鉴定和肉毒梭菌（Clostridium botulinum）毒素的检测；PN-A-82055-12（已撤销标准）

微生物学 PN-A-82055-12

概述

本标准的内容。PKN 目录卡片上的范围，全文：“论述了以下检验方法：检测厌氧芽孢菌和亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌的存在；鉴定肉和肉制品中最常见的某些厌氧芽孢菌菌种；检测所检菌株培养物和食品试样中肉毒梭菌毒素的存在”。卡片上的标题：„Mięso i przetwory mięsne -- Badania mikrobiologiczne -- Wykrywanie obecności beztlenowych bakterii przetrwalnikujących i beztlenowych bakterii przetrwalnikujących redukujących siarczany(IV)”（肉和肉制品——微生物检验——厌氧芽孢菌和亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌存在的检测）。我们未读本标准的文本——不了解标准中方法的步骤、培养基、温度和试样量。

状态（PKN 卡片状态，08.11.2026）。PN-A-82055-12:1997（波兰文版）卡片带有 “Wycofana”（已撤销）标记和 “Data wycofania: 04-07-2007”（撤销日期）一行；没有 “Zastąpiona przez”（被替代）栏——卡片未指明后续标准。版本：发布于 28-10-1997，10 页，价格组 E，食品、农业和林业部门，KT 93 肉、蛋及其制品技术委员会，ICS 07.100.30，“替代：PN-A-82054:1983——波兰文版”。PN-A-82054:1983 „Mięso i przetwory mięsne -- Badania bakteriologiczne”（肉和肉制品——细菌学检验）卡片——“已撤销并被替代”，撤销日期 07-01-1999；替代它的是十二项标准：PN-A-82055 系列的第 2、3、4、6、7、8、9、10、11、12 和 14 分册以及 PN-ISO 13720:1999——一项涵盖抽样和试样制备、接种以及多项测定结果解释的标准，被分别论述各个问题的分册所替代。在 PKN 目录中检索 “PN-A-82055”（08.11.2026）得到该系列的 17 个分册和第 4 分册的修改单 Az1:2002；无 “Wycofana”（已撤销）标记的只有 PN-A-82055-4:1997（密封罐头的密封性检验）及其修改单——其余全部，包括第 2 分册（检验通则）和第 3 分册（试样和稀释液的制备），均已撤销。撤销时间：04-07-2007。替代标准：根据卡片——无。对结果的变化：没有后续标准，无从比较；主题最接近的现行标准 PN-EN ISO 15213-1:2023-08（PKN 卡片无撤销注释，读取于 08.11.2026：用菌落计数法测定亚硫酸盐还原厌氧菌和亚硫酸盐还原 Clostridium spp. 的数量；替代 PN-ISO 15213:2005）给出的是菌落数，而不是存在与否的结果，且卡片未将其列为 PN-A-82055-12 的后续标准。

实验室数量及形式（认可范围数据库副本，读取于 08.11.2026；labcoda.pl 上的“实验室”标签页，08.11.2026；PCA 网站上的现行认可范围文件，读取于 08.11.2026）。编号 82055-12 在副本中出现在 6 家波兰实验室的 8 个项目中：AB 400（2 个）、AB 1415（2 个）、AB 437、AB 462、AB 483、AB 510（各 1 个）；其他国家的实验室没有该编号。按项目的所有字段和编号的所有写法计数（也核查了系列号后带冒号、斜线、点和空格的写法）；本集合不包括 PN-A-82055 系列的其他分册。写法：不带年份的 “PN-A-82055-12”（AB 400——2 个，AB 462）、“PN-A-82055-12:1997”（AB 437）、“PN-A-82055-12:1997 pkt.2”（AB 483）、“PN-A-82055-12:1997 p. 2”（AB 510）、“PN-A-82055-12:1997 z wył. pkt 4”（即排除该条；AB 1415——2 个）。PCA 现行认可范围文件：AB 400——第 37 版，07.08.2026（2 个项目），AB 462——第 31 版，27.04.2026，AB 483——第 26 版，04.05.2026，AB 510——第 25 版，07.08.2026，AB 1415——第 17 版，08.04.2026（2 个项目）——写法与副本相同；AB 437 在 10.09.2026 的第 31 版中已不再有本标准。因此，PCA 现行文件中有 5 家实验室的 7 个项目。“实验室”标签页（“PN-A-82055-12”）显示 6 家实验室和 8 个项目——包括 AB 437，因为它读取的数据与副本相同（labcoda.pl 上的标签页查询，08.11.2026）。

实验室检测什么（数据库副本，完整项目——8 个）。在一个项目中同时检测厌氧芽孢菌和亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌的存在：AB 483——肉和肉制品，培养法；AB 510——肉和肉制品、禽肉、鱼和鱼制品、浓缩食品、水果和蔬菜制品以及蔬菜肉类制品、熟食制品、食品添加剂，培养法加生化确认；AB 437——肉和肉制品、禽肉和禽肉制品、鱼和鱼制品、冷冻制品、罐头、熟食制品和肉菜制品，培养法加生化和显微镜确认；AB 400（两个项目）——灵活认可范围内的食品，培养法加生化确认；AB 462——灵活认可范围内的食品和饲料，表述为“厌氧产芽孢杆菌”，生化确认的方法。AB 1415 将检验分为两个项目——厌氧芽孢菌的存在，以及单独的亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌的存在——针对肉和肉制品，采用培养法加显微镜和生化确认，不含本标准第 4 条。没有任何项目给出数值范围或检测细菌所用的试样量。首席兽医官批准的实验室名单（2018 年，2018 年 GIWlab 决定）列出两家实验室有本标准：用于肉和肉制品，注明第 2 条；以及用于食品，与实验室自有作业指导书一起，表述为“在规定质量/体积试样中……存在的检测”。

此类检测的过程（瓦尔米亚-马祖里大学食品微生物学实验指导书，2012——这不是本标准的文本，我们不从中引用数值）。芽孢在试样经加热（杀灭营养细胞）后测定。对于亚硫酸盐还原厌氧芽孢杆菌，将试管中的接种物用熔化并冷却的含亚硫酸钠和柠檬酸铁铵的鉴别培养基浇注，凝固后覆盖一层水琼脂并培养，每天检查生长情况；重复试管中出现黑色菌落（亚硫酸盐还原生成的硫化铁）表明在所检材料量中存在亚硫酸盐还原厌氧菌芽孢。PN-A-82055-12 标准是否规定相同的培养基、条件和用量，我们不知道。

容易得到表面正确结果的地方。标准：依据 2007 年撤销且无后续标准的标准所得结果，在 PKN 目录中没有现行对应标准——报告中必须注明 1997 年版；五家实验室在现行认可范围中保留本标准，一家（AB 437）在 10.09.2026 的版本中将其删除，而“实验室”标签页仍显示该实验室。抽样和制备：定性结果针对规定质量或体积的试样——“0.1 g 中未检出”和“1 g 中未检出”是不同的结果，而认可范围中没有任何项目给出这一用量；该系列的第 2 和第 3 分册（检验通则、试样和稀释液的制备）也已撤销。测量：“厌氧芽孢菌”和“亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌”是两个不同的结果——第一组的结果对第二组毫无说明，反之亦然；AB 1415 将其写为两个项目，其他实验室写为一个。卡片列出三种方法（检测、菌种鉴定、肉毒梭菌毒素）；AB 1415 排除第 4 条，AB 483 和 AB 510 引用第 2 条——哪一条包含哪种方法，我们未读；不注条号的“依据 PN-A-82055-12”结果，无法说明是否包括菌种鉴定或毒素检测。对象范围：本标准标题涉及肉和肉制品；AB 400 和 AB 462 将其用于灵活认可范围内的食品（AB 462 还用于饲料），AB 510 和 AB 437——还用于鱼、浓缩食品、果蔬制品和食品添加剂——本标准是否允许肉以外的其他产品，从卡片看不出。计算：定性结果不换算为数量——它与依据 PN-EN ISO 15213-1 的亚硫酸盐还原 Clostridium spp. 菌落数（知识库中的单独条目）不可比较，即使两种结果出现在同一份报告中（AB 400 对食品同时有两项标准：PN-A-82055-12 和 PN-EN ISO 15213-1）。

我们未提供的内容。我们未读 PN-A-82055-12:1997 的文本，在公开渠道中既未找到其文本，也未找到描述其步骤的出版物。我们不提供：试样量、加热方式、培养基、培养温度和时间、确认方式（生化、显微镜）、鉴定所涵盖的菌种、肉毒梭菌毒素检测的步骤、本标准的条款编号以及结果表示方式。上文所述步骤来自大学实验指导书，并已如此标明。我们未查明 PKN 为何撤销本标准而不指明后续标准。PN-ISO 13720:1999 的状态和该系列其余分册的卡片我们未单独读取（分册状态——来自 PKN 检索列表，08.11.2026）。我们未核查现行法规对本标准的引用。我们未查阅副本以外实验室的 PCA 现行认可范围文件。

方法原理

培养法定性检验：在规定量的肉或肉制品试样中检测厌氧芽孢菌的存在，并以单独结果检测其中能还原亚硫酸盐的细菌，进行生化确认（部分认可范围中还有显微镜确认）；根据 PKN 卡片，本标准还描述了某些菌种的鉴定和肉毒梭菌毒素的检测（PKN 卡片；我们未读本标准文本——不提供步骤、培养基和条件）。

应用领域

• 肉和肉制品——厌氧芽孢菌和亚硫酸盐还原厌氧芽孢菌的存在（PKN 卡片）
• 根据 PKN 卡片还包括：某些厌氧芽孢菌菌种的鉴定，以及培养物和食品试样中肉毒梭菌（Clostridium botulinum）毒素的检测
• 认可范围中：副本中 6 家波兰实验室（PCA 现行文件中 5 家）——肉和肉制品、禽肉、鱼、罐头、熟食制品，灵活认可范围中还有食品和饲料
• 本标准于 04-07-2007 撤销，无后续标准——结果须注明 1997 年版

关键参数

标准

标准编号

PN-A-82055-12:1997（波兰文版；04-07-2007 撤销，未指明后续标准）

标准名称（波兰语）

Mięso i przetwory mięsne — Badania mikrobiologiczne — Wykrywanie obecności beztlenowych bakterii przetrwalnikujących i beztlenowych bakterii przetrwalnikujących redukujących siarczany(IV)

标准名称（英语）

Meat and meat products — Microbiological examination — Detection of anaerobic spore-forming bacteria and anaerobic spore-forming sulphite-reducing bacteria

分步操作程序

1. 试样和检验量

   肉或肉制品试样；检测细菌所用的量决定结果——依据本标准（不提供）和委托要求；该系列关于检验通则和试样制备的分册（第 2 和第 3 分册）已撤销（PKN 卡片，08.11.2026）。

2. 加热和接种

   加热以杀灭营养细胞，在试管中进行培养基深层接种，覆盖琼脂层（依据大学实验指导书的一般步骤；我们未读本标准的条件）。

3. 厌氧条件下培养

   检查生长情况；黑色菌落表明存在亚硫酸盐还原菌（大学实验指导书；不提供依据本标准的时间和温度）。

4. 确认

   生化确认，部分认可范围中还有显微镜确认（认可范围）；根据 PKN 卡片，本标准还描述了某些菌种的鉴定和肉毒梭菌毒素的检测。

5. 结果

   两组细菌各自在所检试样量中检出或未检出，并注明标准版本和所用条款。PN-A-82055-12:1997——已撤销（04-07-2007），未指明后续标准（PKN 卡片状态，08.11.2026）。

所需设备与仪器

试剂、培养基与耗材

职业健康与安全

• 食品中的厌氧芽孢菌培养物可能含有致病菌株，而根据 PKN 卡片，本标准的方法之一涉及肉毒梭菌毒素——须在适合此类微生物及其毒素的生物安全条件下工作（一般原则；我们未读本标准文本）
• 技术提示：定性结果与依据 PN-EN ISO 15213-1 的亚硫酸盐还原 Clostridium spp. 菌落数不可互换；本标准已撤销且无后续标准——报告中注明 1997 年版

常见问题