🍎 用基于抗体的方法（ELISA 及其他免疫分析）检测和定量食品中的食物过敏原及致敏成分——定性和定量方法的总体框架，对检测作为致敏食品存在标志物的蛋白质或肽的方法的指南和性能准则，对实验室的要求、步骤、结果解释及影响结果的因素；与 EN 15842 配合使用；PN-EN 15633-1:2020-03

食品化学 PN-EN 15633-1

概述

本标准涵盖的内容。标准正文我们读的是 iTeh 的 SIST EN 15633-1:2019 样本（斯洛文尼亚采用的 2019 年 10 月版 EN 15633-1:2019，英文文本）——PN-EN 15633-1:2020-03 等同采用 EN 15633-1:2019（PKN 检索）：目录、欧洲前言、引言、第 1–2 章和第 3 章至 3.3.2——样本止于第 7 页。其余定义、对实验室的一般要求（4）、步骤（5）、结果的解释和表示（6）、影响结果的特定参数（7）以及试验报告（8）我们未读；其标题来自目录。

依据 EN 15633-1:2019 正文。本标准由 CEN/TC 275“食品分析——横向方法”（秘书处 DIN）制定；CEN 于 12.08.2019 批准，各国最迟于 2020 年 4 月采用并撤销冲突标准。本标准取代 EN 15633-1:2009；重要变化：更新术语和定义（3）、分析的前提要求（5）、方法验证参数（6）和对结果的特定影响（7）。引言：特定蛋白质、蛋白质组或由其衍生的肽可作为引起过敏反应的食品或成分存在的标志物；本文件描述在从样品中提取的蛋白质中对这类分析物进行定性检测和/或定量；适当的提取程序包含在各方法中；重点是基于抗体的方法；“shall”——要求，“should”——建议，“may”——允许，“can”——可能性。范围（1）：用基于抗体的方法测定食品中食物过敏原和致敏成分的定性和定量方法的总体框架；此类方法的一般指南和性能准则；其他方法也能检测这些蛋白质；这些指南、最低要求和准则旨在确保私营和官方实验室以及现场检测中不同分析人员获得可重现的结果；本文件在 EN 15842 之外配合使用；也可能适用于其他样品类型。引用文件（2）：EN 15842（食物过敏原检测——一般考虑和方法验证）。定义（3）：蛋白质变性——使二级、三级和四级结构改变、只剩一级结构或其部分的处理（热、化学、酶或其他）；可改变抗原性；蛋白质交联——蛋白质之间的化学反应或物理相互作用，可改变蛋白质从基质中的可提取性；抗体（脊椎动物 B 淋巴细胞针对抗原产生的免疫球蛋白，与之或与相关结构如表位结合）；抗原；过敏原——引起免疫球蛋白 E 介导的过敏反应的抗原（麸质除外），在本文件范围内为蛋白质性质；克隆；单克隆抗体（来自单一杂交瘤克隆，针对单一表位）和多克隆抗体（多个 B 细胞，针对同一抗原的不同表位）；抗体特异性；交叉反应——抗体与目标抗原以外的物质结合；表位（线性或构象）；偶联物（抗体或其他物质与酶、荧光染料、颗粒、放射性标记连接；酶偶联物需加底物）；蛋白质印迹（将电泳分离的蛋白质转移到膜上并用偶联物显示——本文件不再讨论）；ELISA——结合酶联抗体（或抗原）和底物生成有色或荧光产物的体外试验，可定性或定量，通常在微孔板中进行。

状态（截至 03.10.2026）。PKN 检索（关键词“PN-EN 15633-1”，03.10.2026）列出 PN-EN 15633-1:2020-03 波兰文版和英文版，“采用：EN 15633-1:2019 [IDT]”，无撤销标注；PN-EN 15633-1:2009（英文版）——“已撤销并被 PN-EN 15633-1:2020-03 替代”。

实验室数量及引用形式（认可范围数据库副本，数据截至 17.09.2026，读取于 03.10.2026）。编号 15633-1 出现在 2 家实验室的 3 条记录中：AB 381（1 条）和 AB 819（2 条）。在 PCA 现行文件中（读取于 03.10.2026；AB 381 第 29 版 10.06.2026，AB 819 第 23 版 04.08.2026）该编号出现于相同的 2 家实验室；每份文件的页码标记数等于 PDF 页数，无重复；检索 03.10.2026 从 BIP 下载的全部 PCA 文件，未发现数据库副本以外的实验室。AB 819 为“PN-EN 15633-1:2020-03”，AB 381 为不带年份的“PN-EN 15633-1”——两家均同时引用试剂盒生产商说明书（AB 381 还引用程序 PB/PACH/39）。这些项目均未被暂停。“实验室”标签页（关键词“PN-EN 15633-1”）显示这两家实验室——已于 03.10.2026 在 labcoda.pl 生产服务器上通过标签页查询核实。

实验室检测内容（PCA 中的项目）。AB 381：食品以及食品生产和流通区域的环境样品——用 ELISA 测定致敏蛋白含量，按生产商说明书。AB 819：广泛的食品（肉、鱼、熟食、糖果、乳、海鲜、果蔬、加工制品、谷物、蛋及其他）——醇溶蛋白 (2.5–40) mg/kg，麸质由计算得出，按 RIDASCREEN Gliadin 说明书（03.06.2024）；肉和肉制品、熟食——大豆蛋白 (2.5–6000) mg/kg，按 RIDASCREEN FAST Soya 说明书（01.10.2025）；ELISA。

容易得到看似正确结果的地方。麸质：本标准对过敏原的定义排除了麸质（3.2.3）——引用 PN-EN 15633-1 测定醇溶蛋白（AB 819）依据的是免疫学方法框架，但在该定义意义上麸质不是“过敏原”。加工：变性改变蛋白质的抗原性，交联改变其从基质中的可提取性（3.1.1、3.1.2）——经加工的样品即使含有该成分也可能结果偏低。交叉反应：抗体可能结合其他抗原上的相似表位（3.2.8）——阳性结果不能证明恰好存在该成分。抗体类型：单克隆抗体识别一个表位，多克隆抗体识别不同表位（3.2.5、3.2.6），影响能否检出加工后的蛋白质。程序：本标准是框架——具体提取、校准和范围由试剂盒生产商说明书给出，在 PCA 中列于标准旁边。版本：PN-EN 15633-1:2009 已撤销并被替代；不带年份的项目（AB 381）未指明版本。

我们不提供的内容。第 4–7 章中对实验室的要求、步骤、验证准则、结果解释和影响因素我们不引用——它们在样本之外。本条目不概述 EN 15842 和试剂盒生产商说明书的内容。我们不提供过敏原标识阈值或麸质限值。

方法原理

用基于抗体的试验检测从食品样品中提取的蛋白质，抗体针对作为致敏成分标志物的蛋白质或肽。在 ELISA 中，酶联抗体（或抗原）结合分析物，加入的底物生成有色或荧光产物，其信号表明标志物的存在或含量。本标准规定此类方法的框架和准则；具体提取和校准由相应检测的程序给出。

应用领域

• 食品中食物过敏原和致敏成分的定性检测和定量测定（1）
• 基于抗体的方法：ELISA 及其他免疫分析，包括现场检测（1、3.3.2）
• 食品及食品生产环境样品——致敏蛋白、醇溶蛋白、大豆蛋白——PCA 中 2 家实验室的 3 条认可范围记录

关键参数

标准

标准编号

PN-EN 15633-1:2020-03

标准名称（波兰语）

Artykuły żywnościowe — Wykrywanie alergenów pokarmowych metodami immunologicznymi — Część 1: Postanowienia ogólne

标准名称（英语）

Foodstuffs — Detection of food allergens by immunological methods — Part 1: General considerations

分步操作程序

1. 方法选择

   针对标志物蛋白的抗体检测；EN 15842 和 PN-EN 15633-1（1、2）。PN-EN 15633-1:2020-03——2009 版已撤销并被替代（PKN，03.10.2026）。

2. 蛋白质提取

   提取程序是各方法的组成部分（引言）。

3. 测定

   定性或定量 ELISA（3.3.2；第 5 章在样本之外）。

4. 解释

   结果表示和验证准则（第 6 章在样本之外）。

5. 影响因素

   变性、交联、交叉反应（3.1、3.2.8；第 7 章在样本之外）。

所需设备与仪器

试剂、培养基与耗材

职业健康与安全

• 所读部分未包含安全要求；试剂操作规则见试剂盒生产商说明书

常见问题