猪肉旋毛虫检测:lumiVAST Trichinella(化学发光免疫分析)获准作为等效方法,参考方法为ISO 18743:2015/Amd1:2023;取膈肌脚样品至少1 g,种用母猪和公猪2 g,分割肉5 g;欧盟参考实验室验证中50个样品全部判定正确
欧盟委员会实施条例(EU)2025/506于2025年3月20日公布,2025年4月9日生效,修订关于肉类旋毛虫官方控制的条例2015/1375附件I。参考方法改为ISO 18743:2015/Amd1:2023版本标准;条例本身规定了从家猪采样的样品质量(该标准未作规定),并在等效方法中增加F部分——用lumiVAST Trichinella检测自动检出旋毛虫,仅限家猪肉。
- 样品质量(家猪):整个胴体——从膈肌脚肌肉向腱质过渡处取至少1 g(如能保证1.00–1.15 g的精度,可使用专用旋毛虫镊);种用母猪和公猪至少2 g。无膈肌脚时——从膈肌肋部或胸骨部、咬肌、舌或腹肌取2 g,种用母猪和公猪取4 g。分割肉——取至少5 g脂肪少的横纹肌,尽可能靠近骨或腱;不经充分加热的肉也取同样质量。
- F部分(lumiVAST Trichinella):按制造商说明制备和分析样品,仪器按说明校准和维护。混合样品结果为阳性或可疑时,从每头猪再取20 g;五头猪的样品合并后用同一方法检测,若该组为阳性,则每头猪的20 g单独检测。结果为阳性或可疑时,至少20 g肌肉送国家参考实验室用参考方法确认;寄生虫保存于70–90 %乙醇中以鉴定到种。
- 欧盟寄生虫参考实验室报告(意大利高等卫生研究院,2018年6月–2024年7月):制造商Euroimmun的检测以化学发光免疫分析检出旋毛虫抗原(T. spiralis、T. britovi、T. nativa、T. pseudospiralis);肉样与PBS缓冲液在刀式研磨机中粉碎,离心后的上清液用SuperFlex分析仪检测。参与验证的有奥地利、法国、德国和波兰的国家参考实验室以及欧盟参考实验室,样品为100 g、加入3或5条幼虫。
- 验证过程:第一轮(2021年5月)50个样品中5个假阴性(2个含3条T. pseudospiralis幼虫的样品,含5条T. spiralis、5条T. britovi和3条T. nativa幼虫的样品各1个),无假阳性;第二轮(2022年2月)44个中5个,均为3条T. pseudospiralis幼虫的样品;制造商改进了粉碎(刀片、容器、研磨时间)和判定阈值。第三轮(2024年7月;将含3条幼虫的10 g肉加入90 g膈肌)全部50个样品判定正确,满足2022年4月1日指南的要求:无假阳性、无假阴性。欧盟参考实验室指出的不足:分析仪需定期维护。