枯草芽孢杆菌CBS 148232蛋白酶与三株芽孢杆菌芽孢用于育肥猪：以染色酪蛋白比色法测活性（pH 10，50 °C），按CEN/TS 17697以PFGE鉴定菌株，按EN 15784计数——最低5000 U和1.5 × 10⁸ CFU/kg
欧盟委员会实施条例（EU）2025/2502于2025年12月12日公布，批准Genencor International B.V.的制剂（4a63，EFSA意见中为Syncra® SWI 201 TPT）——由转基因菌株枯草芽孢杆菌CBS 148232生产的蛋白酶（EC 3.4.21.62）以及贝莱斯芽孢杆菌NRRL B-50508、NRRL B-50509和枯草芽孢杆菌NRRL B-50510的活芽孢——作为消化率改善剂用于所有猪种的育肥猪和次要猪种的断奶仔猪，有效期至2036年1月1日。申请人已于2025年6月27日撤回针对哺乳仔猪的申请。
- 附件中的方法：添加剂、预混料和饲料中的蛋白酶——基于pH 10.0、50 °C下水解染色交联酪蛋白底物的比色法；菌株鉴定——按CEN/TS 17697的脉冲场凝胶电泳（PFGE）或DNA测序；芽孢杆菌总数——按EN 15784在胰蛋白胨大豆琼脂上涂布平板计数。一个活力单位是在上述条件下每分钟从酪蛋白中释放2.3 µg酚类化合物（以酪氨酸计）的酶量。
- 组成：蛋白酶至少50 000 U/g，芽孢杆菌至少1.5 × 10⁹ CFU/g（菌株比例1:1:1），矿物油≤ 0.4 %，聚乙烯醇≤ 3.5 %。EFSA报告的五个批次：67 120–73 560 U/g（平均70 340），4.6–8.0 × 10⁹ CFU/g；三个批次中砷0.06–0.10、镉0.03–0.04、铅0.16–0.26 mg/kg，汞< 0.005 mg/kg，蜡样芽孢杆菌< 10 CFU/g；粉尘潜力106–133 mg/m³。
- 稳定性：25 °C下15个月后细菌减少0.6 log、活力下降18 %，40 °C下12个月后为0.6 log和38 %；预混料中6个月后活力下降9 %；95 °C制粒活力下降7.6 %，细菌无损失。饲料均匀性：细菌CV 1.7 %，蛋白酶活力CV 8 %。
- 申请人建议的最低用量为1250 U和3.75 × 10⁷ CFU/kg饲料，而EFSA（2025年1月29日意见）认为在5000 U和1.5 × 10⁸ CFU/kg时可能有效——这些数值被法规定为最低含量。应委员会询问，EFSA于2025年5月5日确认“处于相同生理阶段的其他次要猪种”指次要猪种的断奶仔猪或育肥猪。该制剂对眼睛和皮肤无刺激，但属皮肤和呼吸道致敏物。