欧盟联合研究中心：数字RT-PCR可在污水中区分H5N1高致病性禽流感病毒（2.3.4.4b分支）与季节性流感——基于两组双重检测的方法发表于《新发传染病》（Emerging Infectious Diseases）
欧盟委员会联合研究中心（JRC）于2026年10月21日公布了一种实验室方法，可在污水样品中区分季节性流感病毒与2.3.4.4b分支的H5N1高致病性禽流感病毒。该方法在数字RT-PCR中结合两组双重检测：美国疾控中心（CDC）Flu SC2组合中的甲型和乙型流感检测，以及JRC于2025年开发的JRC-HA/JRC-MP双重检测。
- JRC-HA检测针对2.3.4.4b分支H5N1病毒血凝素基因的保守区，JRC-MP检测针对基质基因的保守区，用于确认甲型流感病毒的存在；JRC双重检测中的两项检测同时进行。据JRC介绍，这样可以在同一样品中检出季节性流感，并在浓度极低时识别禽流感病毒。
- 该方法发表于《新发传染病》（Emerging Infectious Diseases）第32卷第11期（2026年11月，DOI 10.3201/eid3211.261234）。研究使用了来自意大利北部野鸟和家禽的10份2.3.4.4b分支H5N1病毒样品（2025年10月至12月），以及以已知量RNA加标的不含流感病毒的污水RNA提取物。检出限为每反应5个拷贝。
- 在35拷贝/微升季节性甲型流感RNA背景下加入10或20拷贝/微升H5N1 RNA时，JRC-HA和JRC-MP检测可选择性检出H5N1，而CDC甲型流感检测对两种病毒的检出不加区分。在3500拷贝/微升季节性流感背景下，JRC-HA仍可检出H5N1且无交叉反应。作者建议分两步使用：CDC双重检测用于甲型和乙型流感的常规监测，JRC双重检测用于识别2.3.4.4b分支并提供早期预警；作者同时指出，仍需在自然条件下和不同污水基质中进行现场评估。
- JRC表示，该方法已应用于意大利伦巴第大区的污水监测；合作方包括欧盟禽流感和新城疫参考实验室、意大利国家卫生研究院（Istituto Superiore di Sanità）和米兰比可卡大学。修订后的欧盟《城市污水处理指令》（(EU) 2024/3019）要求成员国通过国家监测系统监测包括流感病毒在内的特定病原体。