长双歧杆菌CNCM I-5642(4e001)用于犬:采用强化梭菌琼脂倾注平板法计数(定量限100 CFU/g),PFGE鉴定——3.5 × 10⁹ CFU/kg饲料,建议至少连续使用6周,有效性直到EFSA第二份意见才获确认
欧盟委员会实施条例(EU)2025/1776于2025年9月9日公布,批准长双歧杆菌CNCM I-5642制剂(PP102I,持证人:Nestlé Enterprises S.A. – Division Nestlé Purina Petcare Europe)作为生理状态稳定剂用于犬,有效期至2035年9月29日——用于提高犬在现实情境中的抗应激能力。EFSA在2022年6月29日的意见中无法确认其有效性(猫的申请已撤回);直到2025年1月28日评估了一项以20只犬进行的新交叉试验,才得出肯定结论。该添加剂对眼睛有刺激性,并对皮肤和呼吸道有致敏性。
- 附件中的方法:鉴定——DNA测序或PFGE(CEN/TS 17697);添加剂和配合饲料中的计数——强化梭菌琼脂倾注平板法(波兰语文本描述为“用于检测、分离和计数梭菌的增强琼脂培养基”)。据EURL报告,该方法经单一实验室验证:添加剂中1.3 × 10¹¹ CFU/g时Sr和Sip = 0.06 log₁₀,饲料中(9.2 × 10⁸–8.0 × 10⁹ CFU/g)Sr为0.04–0.13、Sip为0.04–0.17 log₁₀;按ISO 7218得出饲料定量限为100 CFU/g。
- 添加剂(2022年意见):至少5 × 10¹⁰ CFU/g;五个批次平均7.72 × 10¹⁰ CFU/g(6.00–9.50 × 10¹⁰)。镉0.061 mg/kg,铅0.018 mg/kg,汞0.016 mg/kg,砷两个批次低于定量限、第三批为0.017 mg/kg;锰1.9–2.7、锌9.1–9.8 mg/kg;PCDD/F 0.222 ng WHO-TEQ/kg(0.099–0.463);霉菌毒素低于检出限。无粉尘(0 mg/m³,Stauber-Heubach法);4 °C储存8个月无损失,在干燥补充饲料中23 °C储存88天、32 °C储存48天也无损失;饲料中均匀度——CV 15 %(36个子样)。
- 新研究(2025年意见):20只成年犬,交叉设计——2 × 42天,中间洗脱期23天,每只犬每天1 × 10⁹ CFU,混入1 g补充饲料。应激挑战:到诊所就诊、乘车10分钟、第二次就诊、恢复30分钟。第一次就诊时耳温38.1对38.4 °C,LF/HF 0.22对0.33;乘车时站立13.9对28.9 s,躺卧345对278 s;恢复期RMSSD 102对83 ms,pNN50 34.4对23.5 %。血清皮质醇无变化;打哈欠增加(0.42对0.23)。显著性水平设为0.10。
- 附件中的条件:全价饲料至少3.5 × 10⁹ CFU/kg(相当于每只犬每天1 × 10⁹ CFU);添加剂、预混料和配合饲料标签上须注明:“建议至少连续使用6周”;须注明储存条件和热处理稳定性。OECD 492试验使细胞存活率降至33 %——该添加剂对眼睛有刺激性(无法确定分类),对皮肤无刺激性(OECD 439);须防护皮肤、眼睛和呼吸道。