副地衣芽孢杆菌DSM 33902和枯草芽孢杆菌DSM 33903用于产奶反刍动物(4b1896)至2036年1月1日:按EN 15784在胰蛋白胨大豆琼脂上计数,饲料3.8 × 10⁸ CFU/kg或饮水7.4 × 10⁷ CFU/l及每头每日9.6 × 10⁹ CFU;红霉素MIC > 16 mg/l但无获得性耐药基因
欧盟委员会实施条例(EU)2025/2511于2025年12月12日公布,批准由两株芽孢杆菌芽孢组成的制剂(持有人:Chr. Hansen A/S,产品Bovacillus™)作为肠道菌群稳定剂用于产奶或繁殖用反刍动物(也可用于饮水),有效期至2036年1月1日。EFSA在2025年4月9日的意见中认为其安全并对奶牛具有功效潜力;对皮肤和眼睛无刺激性,但具有皮肤和呼吸道致敏性。对于饮水,EFSA提出按每头动物剂量,因为反刍动物无法确定固定的饲料与饮水比例——法规同时规定了饮水浓度和每日剂量。
- 附件中的方法:添加剂、配合饲料和饮水中的计数——在胰蛋白胨大豆琼脂上涂布平板(EN 15784);鉴定——DNA测序或PFGE(CEN/TS 17697)。添加剂:芽孢杆菌总计至少3.2 × 10¹⁰ CFU/g,两株比例1:1;最低用量为全价饲料3.8 × 10⁸ CFU/kg或饮水7.4 × 10⁷ CFU/l,饮水中每头每日剂量至少9.6 × 10⁹ CFU。须说明热处理稳定性和饮水中稳定性;须对呼吸道和皮肤采取防护。
- 菌株:副地衣芽孢杆菌分离自土壤(与模式菌株KJ-16T的ANI为98.6 %;芽孢经巴氏处理),枯草芽孢杆菌分离自大豆醪(与枯草芽孢杆菌168T的ANI为97.7 %)。副地衣芽孢杆菌MIC:氯霉素和克林霉素高于临界值一个稀释度,红霉素 > 16 mg/l(临界值4);对ResFinder和NCBI中的命中(四个和两个)分析后未发现获得性耐药基因。Vero细胞毒性试验——无裂解;副地衣芽孢杆菌上清液不抑制参考菌株,排除了产生值得关注水平的杆菌肽。
- 两种剂型:Bovacillus™ 10(载体碳酸钙,用于饲料)——平均4.6 × 10¹⁰ CFU/g,砷0.48、铅0.77、镉0.13 mg/kg,粉尘潜力1886 mg/m³(943–2480);Bovacillus™ WS(麦芽糊精,用于饮水)——4.3 × 10¹⁰ CFU/g,粉尘潜力1149 mg/m³。在75、85和95 °C下制粒30秒——损失 < 0.5 log;85 °C制粒饲料均匀度CV 15 %;25 °C水中48小时无损失。刺激性:剂型10按OECD TG 404和TG 438测试,WS按类推得出结论。
- 功效:三项奶牛试验(荷斯坦-弗里斯牛及其与瑞典红牛杂交种,12–15周,68–76头)——试验1 ECM效率更好(1.72对1.67),试验2产奶量更高(41.3对40.1 kg/天)且饲料效率更好(1.52对1.48),试验3饲料效率1.59对1.54;对乳成分无影响。显著性水平设为p < 0.10,计算所得饲料中浓度为3.08–3.41 × 10⁸ CFU/kg,而预期为3.8 × 10⁸。