🍎 Vitamin C (L-Ascorbinsäure) in Lebensmitteln — Titrationsverfahren nach Tillmans (2,6-Dichlorphenolindophenol) für farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse und spektrophotometrisches Verfahren mit Extraktion des Farbstoffüberschusses mit Xylol für stark gefärbte Erzeugnisse; PN-A-04019
Kurz gefasst
Gehalt an Vitamin C in Lebensmitteln, in Milligramm je 100 g (oder je 100 ml). Die Prüfung erfolgt nach PN-A-04019:1998 (polnische Fassung); STATUS (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026): PN-A-04019:1998 gültig (polnische Fassung), ohne Rückzugsvermerk; Karte ohne Feld „Wprowadza“ (übernimmt); ersetzte PN-A-75101-11:1990, PN-A-86030:1978, PN-R-87020:1992 und PN-A-79033:1985. Das Verfahren umfasst 5 Schritte; eingesetzt wird sie unter anderem für: Farblose und schwach gefärbte Lebensmittel — Titrationsverfahren nach Tillmans (PKN-Karte), Stark gefärbte Lebensmittel — spektrophotometrisches Verfahren mit Extraktion des Farbstoffüberschusses mit Xylol, 500 nm (PKN-Karte; Artikel von 2013), Ergebnis: Gehalt an L-Ascorbinsäure in mg/100 g (in den Akkreditierungsumfängen auch mg/100 ml) — ohne Dehydroascorbinsäure.
Auf einen Blick
- Norm: PN-A-04019:1998 (polnische Fassung)
- Kategorie: Lebensmittelchemie
- Verfahrensschritte: 5
- STATUS (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026): PN-A-04019:1998 gültig (polnische Fassung), ohne Rückzugsvermerk; Karte ohne Feld „Wprowadza“ (übernimmt); ersetzte PN-A-75101-11:1990, PN-A-86030:1978, PN-R-87020:1992 und PN-A-79033:1985
- Wahl des Verfahrens — Bedingung (PKN-Karte): Titration nach Tillmans — farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse; spektrophotometrisch — stark gefärbte Erzeugnisse
- Konzentration der Ascorbinsäure in der Prüflösung — Bedingung (ISO 6557-2, 2.4.3.1 und 3.4.3.1; nicht der PN-Text): 0,1–1 mg/ml bei der Titration; 0,05–0,5 mg/ml bei der Spektrometrie
Übersicht
WAS DIE NORM BESCHREIBT. Anwendungsbereich aus der PKN-Katalogkarte, vollständig: „Es werden zwei Verfahren zur Bestimmung des Vitamin-C-Gehalts in Lebensmitteln in Abhängigkeit vom Färbungsgrad des Erzeugnisses angegeben. Für farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse wird das Titrationsverfahren nach Tillmans dargestellt, für stark gefärbte Erzeugnisse das spektrophotometrische Verfahren. Festgelegt wird die Vorbereitung von Proben verschiedener Arten von Lebensmitteln für die Prüfung“. Nach dem Artikel von A. Mazurek und M. Włodarczyk-Stasiak (Naturwissenschaftliche Universität Lublin, 2013) verwenden beide Verfahren 2,6-Dichlorphenolindophenol: beim spektrophotometrischen Verfahren wird Ascorbinsäure in saurem Milieu durch einen Überschuss des Farbstoffs quantitativ zu Dehydroascorbinsäure oxidiert, der Farbstoffüberschuss wird mit Xylol extrahiert und spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 500 nm bestimmt. Den Text der Norm PN-A-04019 selbst haben wir nicht gelesen.
STATUS (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026). Karte PN-A-04019:1998 (polnische Fassung) ohne Rückzugsvermerk — Norm GÜLTIG: Veröffentlichung 18-02-1998, 6 Seiten, Preisgruppe C, Sektor Lebensmittel, Landwirtschaft und Forstwirtschaft, KT 200 Lebensmittelkonzentrate, Stärke und diätetische Erzeugnisse, ICS 67.050; Titel „Produkty spożywcze -- Oznaczanie zawartości witaminy C“. „Zastępuje“ (ersetzt): „PN-A-75101-11:1990 - polnische Fassung, PN-A-86030:1978 - polnische Fassung, PN-R-87020:1992 - polnische Fassung, PN-A-79033:1985 - polnische Fassung“. Die Karte hat kein Feld „Wprowadza“ (übernimmt) — sie nennt kein ISO- oder EN-Dokument, das die Norm übernimmt. Die Suche nach „PN-A-04019“ im PKN-Katalog liefert nur diese Karte — eine andere Ausgabe oder fremdsprachige Fassung gibt es im Katalog nicht. Der Artikel von 2013 gibt an, dass die Norm auf der Grundlage von ISO 6557/2:1984 eingeführt wurde; den Text der polnischen Norm haben wir mit dem ISO-Text nicht verglichen. ISO-Seite (Abruf 08.11.2026): ISO 6557-2:1984 „Fruits, vegetables and derived products — Determination of ascorbic acid content — Part 2: Routine methods“ — veröffentlicht, Ausgabe 1 von 1984-11, 4 Seiten, ISO/TC 34/SC 3, ICS 67.080.01, Stadium 90.93; zuletzt 2023 überprüft und bestätigt, diese Fassung ist aktuell.
NACH DEM TEXT DER ISO 6557-2:1984 — DES DOKUMENTS, AUF DEM DIE NORM LAUT ARTIKEL BERUHT (vollständiger französischer Text; dies ist nicht der Text der PN-A-04019). Anwendungsbereich der ISO: Obst, Gemüse und daraus hergestellte Erzeugnisse — Verfahren A, titrimetrisch mit 2,6-Dichlorphenolindophenol, das nur in Abwesenheit bestimmter Störstoffe angewendet werden darf (2.6), und Verfahren B, spektrometrisch mit demselben Farbstoff nach Extraktion mit Xylol, für Erzeugnisse in stark gefärbten Lösungen. Verfahren A (Abschnitt 2): Ascorbinsäure wird aus der Probe mit Oxalsäurelösung 2 % (m/m) oder mit einer Lösung von Metaphosphorsäure und Essigsäure extrahiert (15 g Metaphosphorsäure in 40 ml Eisessig und 200 ml Wasser, auf 500 ml; im Kühlschrank 7–10 Tage verwendbar) und mit der Farbstofflösung bis zur lachsrosa Färbung titriert. Die Farbstofflösung wird in einer braunen Flasche im Kühlschrank aufbewahrt und — da sich der Farbstoff mit der Zeit zersetzt — regelmäßig frisch hergestellt; Ascorbinsäure-Standardlösung 1 g/l (50 mg, auf 0,01 mg genau eingewogen, im 50-ml-Kolben, mit Extraktionslösung aufgefüllt). Vorbereitung: Kerne und Samengehäuse entfernen, gründlich mischen, filtrieren; Tiefkühlerzeugnisse im geschlossenen Gefäß auftauen und die ausgetretene Flüssigkeit vor dem Mischen zugeben. Einwaage 10–100 g (im Text: auf 0,1 mg genau gewogen); Volumen der Extraktionslösung in Millilitern zahlenmäßig das 1- bis 5-Fache der Einwaage in Gramm; filtrieren, die ersten Milliliter verwerfen; Endkonzentration der Ascorbinsäure in der Prüflösung 0,1–1 mg/ml. Einstellung des Farbstoffs: 5 ml Standardlösung mit 5 ml Extraktionslösung werden schnell bis zu einer lachsrosa Färbung titriert, die mindestens 5 s bestehen bleibt, dreimal, Ablesung auf 0,1 ml genau; Blindprobe mit 5 ml Extraktionslösung; das Ergebnis der Blindprobe wird abgezogen, und der Titer wird in Milligramm Ascorbinsäure ausgedrückt, die 1,0 ml Farbstoff entsprechen. Bestimmung: drei Portionen des Filtrats, jede mit etwa 2 mg Ascorbinsäure, schnell bis zum selben Endpunkt titriert; Blindprobe mit demselben Volumen Extraktionslösung; drei Bestimmungen aus derselben Probe. Ergebnis in mg je 100 g Erzeugnis = (V0 − V1) × m1 / m0 × 100, wobei m0 — Masse der Einwaage in der titrierten Portion (g), m1 — Titer des Farbstoffs (mg Ascorbinsäure je 1,0 ml), V0 und V1 — für die Probe und für die Blindprobe verbrauchtes Farbstoffvolumen (ml); Ergebnis ist der Mittelwert aus drei Bestimmungen. Störstoffe (2.6): Eisen, Kupfer, Zinn, Reduktone, Sulfhydrylverbindungen, Sulfite und Schwefeldioxid; Reduktone treten vor allem in übermäßig erhitzten oder lange gelagerten Erzeugnissen auf. Prüfung: 2 Tropfen Methylenblaulösung 0,05 % zu 10 ml eines Gemischs gleicher Volumina Prüflösung und Extraktionslösung — Entfärbung innerhalb von 5–10 s zeigt Störstoffe an; Zinn wird so nicht erkannt — dafür 5 Tropfen Indigokarminlösung 0,05 % zu 10 ml Prüflösung mit 10 ml Salzsäure, verdünnt 1 + 3. Verfahren B (Abschnitt 3): dieselbe Extraktionslösung, Prüflösung 0,05–0,5 mg/ml; Acetatpuffer pH 4 (300 g wasserfreies Natriumacetat, 700 ml Wasser und 1000 ml Eisessig); Xylol auf Reinheit geprüft (nach dem Schütteln mit entfärbtem Farbstoff darf die Xylolschicht nach 10 min nicht gefärbt sein, sonst wird das Xylol destilliert). In ein 25-ml-Zentrifugenröhrchen mit Glasstopfen: 1–5 ml Prüflösung, gleiches Volumen Puffer, sofort Farbstoff im Überschuss, mischen, 10 ml Xylol, 6–10 s kräftig schütteln, zentrifugieren, die Xylolschicht in eine Küvette überführen und die Absorbanz bei 500 nm messen; Blindwert — Absorbanz des reinen Xylols. Kalibrierkurve: vier Röhrchen mit 0,2; 0,4; 0,6 und 0,8 ml Farbstoff. Ergebnis mit derselben Formel, wobei V0 — Volumen des zugegebenen Farbstoffs, V1 — Volumen des Farbstoffüberschusses, abgelesen aus der Kalibrierkurve; zwei Bestimmungen, deren Differenz 3 % des Mittelwerts nicht überschreiten darf (3.6). Korrekturen (3.7): bei Pigmenten, die in das Xylol übergehen — Korrektur mit Hydrochinon (zweite Absorbanz nach Zugabe von Hydrochinonlösung, von der ersten abgezogen); bei lange erhitzten oder gelagerten Erzeugnissen und in manchen Fällen auch bei natürlichen Erzeugnissen (z. B. Saft der Schwarzen Johannisbeere) — Kontrollprobe mit Formaldehyd 40 %, die die Wirkung reduzierender Stoffe korrigiert, die nicht mit Ascorbinsäure zusammenhängen. Bericht (Abschnitt 4): Verfahren, Ergebnis, nicht in der Norm festgelegte oder freigestellte Arbeitsgänge und Ereignisse, die das Ergebnis beeinflusst haben können, Angaben zur Identifizierung der Probe.
WAS DIE WISSENSCHAFTLICHE VERÖFFENTLICHUNG ÜBER DIESE NORM SAGT (Mazurek, Włodarczyk-Stasiak, Current Issues in Pharmacy and Medical Sciences 26(4), 2013, S. 443–447). PN-A-04019:1998 ermöglicht nicht die Bestimmung des Gesamtgehalts an Vitamin C (Summe aus Ascorbin- und Dehydroascorbinsäure), sondern nur der Ascorbinsäure, da Dehydroascorbinsäure nicht mit 2,6-Dichlorphenolindophenol reagiert; andere in der Probe vorhandene reduzierende Stoffe reduzieren den Farbstoff und erhöhen das Ergebnis. Im Referenzmaterial BCR-431 mit einem zertifizierten Wert von 483 mg/100 g (Summe beider Säuren) ergab das spektrophotometrische Verfahren nach der Norm 438 mg/100 g — ein statistisch signifikanter Unterschied — und das HPLC-Verfahren 403,8 mg/100 g Ascorbinsäure und 73,8 mg/100 g Dehydroascorbinsäure: das Ergebnis der Norm lag also unter dem Gesamt-Vitamin-C und über der Ascorbinsäure allein. In Apfel- und Grapefruitsaft sowie in Nektar aus Schwarzen Johannisbeeren unterschieden sich die Ergebnisse beider Verfahren signifikant, übereinstimmend waren sie nur in Orangensaft; den größten Unterschied stellten die Autoren im Nektar aus Schwarzen Johannisbeeren fest. Nach dem Artikel führt das Außerachtlassen der Dehydroascorbinsäure zu großen Fehlern, vor allem bei gelagertem Obst und Gemüse, in dem der Anteil dieser Säure steigt. Der Artikel gibt außerdem an, dass CEN 2010 die Norm EN 14130:2003 (Bestimmung von Vitamin C mit HPLC) ersatzlos zurückgezogen hat — in Übereinstimmung mit der PKN-Karte PN-EN 14130:2004 (zurückgezogen 21-11-2010, ohne angegebene Nachfolgerin; Abruf 08.11.2026).
WIE VIELE LABORATORIEN UND IN WELCHER FORM (Kopie der Datenbank der Akkreditierungsumfänge, Abruf 08.11.2026; Registerkarte „Laboratorien“ auf labcoda.pl, 08.11.2026; aktuelle Dokumente der Akkreditierungsumfänge auf den PCA-Seiten, Abruf 08.11.2026). Die Nummer A-04019 steht in 8 Positionen bei 6 polnischen Laboratorien: AB 285, AB 311, AB 452, AB 705 (je 1) sowie AB 486 und AB 552 (je 2); bei Laboratorien anderer Länder kommt sie nicht vor. Gezählt über alle Felder der Positionen und alle Schreibweisen der Nummer; NICHT in die Menge gehen 16 Positionen mit der Nummer R-04019 ein — das ist eine andere Norm, PN-R-04019 über pflanzenverfügbares Mangan im Boden. Schreibweisen: „PN-A-04019:1998“ ohne Punktangabe (AB 285, AB 552 — 2), „PN-A-04019:1998 pkt. 2“ (AB 311), „PN-A-04019:1998, pkt. 2“ (AB 452), „PN-A-04019:1998 pkt. 2.“ (AB 486 — 2), „PN-A-04019:1998 p. 2“ (AB 705). Alle 8 Positionen stehen in den aktuellen PCA-Dokumenten der Akkreditierungsumfänge im selben Wortlaut: AB 285 — Ausgabe 28 vom 13.01.2026, AB 311 — 27 vom 11.06.2026, AB 452 — 25 vom 30.10.2025, AB 486 — 29 vom 23.07.2026, AB 552 — 26 vom 21.08.2026, AB 705 — 21 vom 06.05.2026. Die Registerkarte „Laboratorien“ („PN-A-04019“) zeigt dieselben 6 Laboratorien mit derselben Zahl von Positionen (8) (Abfrage der Registerkarte auf labcoda.pl, 08.11.2026).
WAS DIE LABORATORIEN PRÜFEN (Kopie der Datenbank, vollständige Positionen — 8). Titrationsverfahren — 7 Positionen bei 5 Laboratorien: AB 311 — Lebensmittel: alkoholfreie Getränke, Säfte, Bonbons, Lebensmittelkonzentrate, Getreideerzeugnisse, Nahrungsergänzungsmittel, Lebensmittel für besondere Ernährungszwecke, (5,0–100000) mg/100 g; AB 486 — hell gefärbte Lebensmittel: alkoholfreie Getränke, Bonbons, Lebensmittelkonzentrate, (2,5–2500) mg/100 g oder 100 ml, sowie hell gefärbte Nahrungsergänzungsmittel, (15–100000) mg/100 g oder 100 ml; AB 552 — Milch und Milcherzeugnisse, Getreidekörner und Getreide- und Mehlerzeugnisse, Süß- und Backwaren, Obst, Gemüse, Pilze und daraus hergestellte Erzeugnisse, auch Gemüse-Fleisch-Erzeugnisse, alkoholfreie Getränke, Lebensmittelkonzentrate, Kaffee, Tee, Kakao, Früchte- und Kräutertees, Lebensmittel für besondere Ernährungszwecke, (1,2–500) mg/100 g und mg/100 ml, sowie Nahrungsergänzungsmittel, (1,2–100000) mg/100 g und mg/100 ml; AB 705 — Säfte, Nektare und alkoholfreie Getränke, (0,3–44,0) mg/100 g; AB 452 — Säfte, Nektare, Getränke, Sirupe, Obst-, Gemüse- und Obst-Gemüse-Pürees, „als L-Ascorbinsäure“, (1–130) mg/100 g, durch potentiometrische Titration. Spektrophotometrisches Verfahren — 1 Position: AB 285 — Obst- und Gemüseerzeugnisse, Ascorbinsäure (Vitamin C), (8,9–315,0) mg/100 g oder mg/100 ml. Vier Laboratorien mit dem Titrationsverfahren nennen Punkt 2 der Norm; AB 285 (Spektrophotometrie) und AB 552 berufen sich auf die Norm ohne Punktangabe. Welches Verfahren Punkt 2 der polnischen Norm beschreibt, haben wir nicht geprüft — in ISO 6557-2 ist Abschnitt 2 das Titrationsverfahren.
NEBEN DIESER NORM. Positionen, in deren Bezeichnung des Prüfmerkmals von Vitamin C oder Ascorbinsäure die Rede ist, gibt es in der Kopie 28 bei 19 polnischen Laboratorien (Abruf 08.11.2026). Außer diesen 8: PN-EN 14130:2004 (HPLC) — 10 Positionen bei 7 Laboratorien, obwohl die Norm laut PKN-Karte seit 21-11-2010 ohne Nachfolgerin zurückgezogen ist (sie hat in der Wissensdatenbank einen eigenen Eintrag); die übrigen 10 — laboreigene Verfahren mit Flüssigchromatographie, die Methodik des IŻŻ-Verlags von 1997 (Titrationsverfahren) und allgemeine Angaben „Normen“ oder „Normen/Verfahren“ in flexiblen Akkreditierungsumfängen. Drei Laboratorien haben beide Wege: AB 452 hat neben PN-A-04019 ein HPLC-Verfahren, bei dem Vitamin C die „Summe aus L(+)-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure“ ist, AB 486 — ein Verfahren mit Flüssigchromatographie, AB 552 — PN-EN 14130:2004.
WO MAN LEICHT EIN SCHEINBAR RICHTIGES ERGEBNIS ERHÄLT. Was wir messen: das Ergebnis dieser Norm ist L-Ascorbinsäure, nicht Vitamin C insgesamt — Dehydroascorbinsäure reagiert nicht mit dem Farbstoff (Artikel von 2013); in gelagerten Erzeugnissen steigt ihr Anteil, daher kann das Ergebnis „Vitamin C“ nach dieser Norm deutlich niedriger sein als das Ergebnis eines Verfahrens, das die Summe beider Säuren bestimmt (z. B. des Verfahrens von AB 452). Das Ergebnis nach PN-A-04019 und das Ergebnis eines Summenverfahrens sind nicht austauschbar, obwohl beide in den Akkreditierungsumfängen „Gehalt an Vitamin C“ heißen. Wahl des Verfahrens: laut Karte ist das Titrationsverfahren für farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse bestimmt; AB 486 schreibt die Bedingung „hell gefärbt“, und AB 552 wendet das Titrationsverfahren auch bei Kaffee, Tee, Kakao und Früchte- und Kräutertees an — wie das Laboratorium die Färbung beurteilt, geht aus dem Akkreditierungsumfang nicht hervor. Messung: reduzierende Stoffe (in ISO 6557-2: Reduktone aus übermäßig erhitzten oder lange gelagerten Erzeugnissen, Sulfhydrylverbindungen, Sulfite, Schwefeldioxid, Eisen, Kupfer, Zinn) entfärben den Farbstoff wie Ascorbinsäure und erhöhen das Ergebnis — im Referenzmaterial BCR-431 lag das Ergebnis des spektrophotometrischen Verfahrens über dem Gehalt an Ascorbinsäure allein; ISO sieht die Prüfung mit Methylenblau und Indigokarmin sowie Korrekturen mit Hydrochinon und Formaldehyd vor — ob und wie die polnische Norm sie vorsieht, haben wir nicht gelesen. Verdünnung: die Titrierlösung soll 0,1–1 mg/ml Ascorbinsäure enthalten (ISO 6557-2) — bei Nahrungsergänzungsmitteln mit einem Bereich bis 100000 mg/100 g (also bis 100 g je 100 g) erfordert das eine vielfache Verdünnung, und jeder Fehler des Faktors geht direkt in das Ergebnis ein. Berechnung: der Titer des Farbstoffs m1 ist eine Messung dieses Verfahrens — Einstellung mit der Standardlösung, mit Abzug der Blindprobe (ISO 2.4.3.2); der Farbstoff zersetzt sich, daher ergibt ein Titer von einem anderen Tag oder aus einer alten Lösung ein Ergebnis, das in allen Proben um denselben Faktor verschoben ist. ISO 6557-2 gibt das Ergebnis nur in mg je 100 g Erzeugnis an; ein Teil der Akkreditierungsumfänge gibt auch mg je 100 ml an — bei einem solchen Ergebnis muss man wissen, ob das Volumen abgemessen oder die Probe gewogen wurde, und ISO gibt keine Umrechnung an.
WAS WIR NICHT ANGEBEN. Den Text der PN-A-04019:1998 haben wir nicht gelesen: nicht angegeben werden die Nummerierung ihrer Punkte, die Vorbereitung von Proben „verschiedener Arten von Lebensmitteln“ (die Karte sagt nur, dass sie in der Norm enthalten ist), Konzentrationen der Reagenzien, Formeln, Präzisionsdaten und Unterschiede gegenüber ISO 6557-2 — der oben angegebene Ablauf stammt aus ISO 6557-2:1984 und ist so gekennzeichnet. Die Konzentration der Farbstofflösung geben wir auch aus ISO nicht an — im gelesenen Text ist die Masse des Farbstoffsalzes je 200 ml auf eine Weise angegeben, die wir mit einer zweiten Quelle nicht bestätigen können. ISO 6557-1 (Referenzverfahren) haben wir nicht gelesen und ihren Status nicht geprüft. Den Status der Karten der durch PN-A-04019 ersetzten Normen (PN-A-75101-11:1990, PN-A-86030:1978, PN-R-87020:1992, PN-A-79033:1985) haben wir nicht gesondert abgerufen — wir wissen nur, dass die Karte PN-A-04019 sie als ersetzt aufführt. Verweise auf die Norm in Rechtsvorschriften haben wir nicht geprüft. Aktuelle PCA-Dokumente der Akkreditierungsumfänge von Laboratorien außerhalb der Kopie haben wir nicht durchgesehen.
Prinzip der Methode
L-Ascorbinsäure reduziert (entfärbt) 2,6-Dichlorphenolindophenol. Beim Titrationsverfahren nach Tillmans wird der Probenextrakt in saurer Lösung mit eingestellter Farbstofflösung bis zur bleibenden Rosafärbung titriert; beim spektrophotometrischen Verfahren wird der Farbstoff im Überschuss zugegeben, der Überschuss in Xylol überführt und bei 500 nm gemessen, und der Farbstoffverbrauch wird aus der Kalibrierkurve abgelesen. Ergebnis — mg Ascorbinsäure je 100 g Erzeugnis; Dehydroascorbinsäure wird nicht bestimmt (PKN-Karte; Artikel von Mazurek und Włodarczyk-Stasiak 2013; Ablauf — ISO 6557-2:1984, Abschnitte 2–3, nicht der Text der polnischen Norm).
Anwendungen
- Farblose und schwach gefärbte Lebensmittel — Titrationsverfahren nach Tillmans (PKN-Karte)
- Stark gefärbte Lebensmittel — spektrophotometrisches Verfahren mit Extraktion des Farbstoffüberschusses mit Xylol, 500 nm (PKN-Karte; Artikel von 2013)
- Ergebnis: Gehalt an L-Ascorbinsäure in mg/100 g (in den Akkreditierungsumfängen auch mg/100 ml) — ohne Dehydroascorbinsäure
- In Akkreditierungsumfängen: 6 polnische Laboratorien — Säfte, Nektare, Getränke, Obst- und Gemüseerzeugnisse, Bonbons, Konzentrate, Getreideerzeugnisse, Milch und Milcherzeugnisse, Nahrungsergänzungsmittel, Lebensmittel für besondere Ernährungszwecke
Schlüsselparameter
| Parameter | Wert |
|---|---|
| STATUS (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026) | PN-A-04019:1998 gültig (polnische Fassung), ohne Rückzugsvermerk; Karte ohne Feld „Wprowadza“ (übernimmt); ersetzte PN-A-75101-11:1990, PN-A-86030:1978, PN-R-87020:1992 und PN-A-79033:1985 |
| Wahl des Verfahrens — Bedingung (PKN-Karte) | Titration nach Tillmans — farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse; spektrophotometrisch — stark gefärbte Erzeugnisse |
| Konzentration der Ascorbinsäure in der Prüflösung — Bedingung (ISO 6557-2, 2.4.3.1 und 3.4.3.1; nicht der PN-Text) | 0,1–1 mg/ml bei der Titration; 0,05–0,5 mg/ml bei der Spektrometrie |
| Endpunkt der Titration — Bedingung (ISO 6557-2, 2.4.3.2–2.4.3.3; nicht der PN-Text) | lachsrosa Färbung, die mindestens 5 s bestehen bleibt; Portionen mit je etwa 2 mg Ascorbinsäure |
| Wellenlänge — Messbedingung (Artikel von 2013 für PN-A-04019; ISO 6557-2, 3.4.3.4) | 500 nm, Xylolschicht mit Farbstoffüberschuss |
| Ergebnis — Formel (ISO 6557-2, 2.5 und 3.5; nicht der PN-Text) | mg/100 g = (V0 − V1) × m1 / m0 × 100; Mittelwert aus drei Bestimmungen (Titration) oder aus zwei (Spektrometrie) |
| Wiederholbarkeit des spektrometrischen Verfahrens — Grenze (ISO 6557-2, 3.6; nicht der PN-Text) | Differenz zweier Bestimmungen ≤ 3 % des Mittelwerts |
| Was das Ergebnis umfasst — Einschränkung (Artikel von 2013) | nur L-Ascorbinsäure; Dehydroascorbinsäure reagiert nicht mit dem Farbstoff, andere reduzierende Stoffe erhöhen das Ergebnis |
| Verbreitung in Akkreditierungsumfängen (Kopie, PCA-Dokumente und Registerkarte, Abruf 08.11.2026) | 6 polnische Laboratorien, 8 Positionen (7 titrimetrische, 1 spektrophotometrische); alle 8 in den aktuellen PCA-Dokumenten; Registerkarte „Laboratorien“ — 6 Laboratorien, 8 Positionen |
Norm
- Normnummer
- PN-A-04019:1998 (polnische Fassung)
- Titel (PL)
- Produkty spożywcze — Oznaczanie zawartości witaminy C
- Title (EN)
- Foodstuffs — Determination of vitamin C content
Schritt-für-Schritt-Verfahren
-
Wahl des Verfahrens
Farbloses oder schwach gefärbtes Erzeugnis — Titrationsverfahren; stark gefärbtes — spektrophotometrisches Verfahren (PKN-Karte). Bei Verdacht auf Störstoffe — Prüfung mit Methylenblau und Indigokarmin (ISO 6557-2, 2.6).
-
Probenvorbereitung und Extraktion
Entfernen der Kerne, Mischen (Tiefkühlerzeugnisse im geschlossenen Gefäß zusammen mit der ausgetretenen Flüssigkeit aufgetaut); Einwaage 10–100 g mit Extraktionslösung im Verhältnis 1:1 bis 1:5; Filtrieren ohne die ersten Milliliter; Lösung 0,1–1 mg/ml (Titration) oder 0,05–0,5 mg/ml (Spektrometrie) (ISO 6557-2, 2.4.1–2.4.3.1, 3.4.3.1).
-
Einstellung des Farbstoffs
5 ml Standardlösung mit 5 ml Extraktionslösung, schnelle Titration bis zu einer lachsrosa Färbung, die mindestens 5 s bestehen bleibt, dreimal; Blindprobe; Titer m1 in mg Ascorbinsäure je 1,0 ml Farbstoff (ISO 6557-2, 2.4.3.2).
-
Bestimmung
Titration: drei Portionen des Filtrats mit je etwa 2 mg Ascorbinsäure, Blindprobe (ISO 6557-2, 2.4.3.3–2.4.5). Spektrometrie: 1–5 ml Lösung + Puffer pH 4 + Farbstoffüberschuss + 10 ml Xylol, Schütteln 6–10 s, Zentrifugieren, Absorbanz der Xylolschicht bei 500 nm, Kalibrierkurve mit 0,2–0,8 ml Farbstoff, zwei Bestimmungen; bei Bedarf Korrektur mit Hydrochinon oder Probe mit Formaldehyd (ISO 6557-2, 3.4.3.3–3.4.6, 3.7).
-
Berechnung und Ergebnis
mg/100 g = (V0 − V1) × m1 / m0 × 100, Mittelwert der Bestimmungen; bei der Spektrometrie Differenz zweier Bestimmungen ≤ 3 % des Mittelwerts; im Bericht das Verfahren und Abweichungen (ISO 6557-2, 2.5, 3.5–3.6, Abschnitt 4). PN-A-04019:1998 — gültig (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026; polnische Fassung).
Erforderliche Geräte und Apparatur
| Gerät | Beispiel | Richtpreis |
|---|---|---|
| Analysenwaage und Homogenisator (ISO 6557-2, 2.3.1–2.3.2) | Herstellung der Einwaage von 10–100 g und der Ascorbinsäure-Standardlösung | — |
| Bürette (ISO 6557-2, 2.3.3) | Fassungsvermögen 10–50 ml; Titrationsverfahren (im Akkreditierungsumfang von AB 452 — potentiometrische Titration) | — |
| Mikrobüretten, Zentrifugenröhrchen und Zentrifuge (ISO 6557-2, 3.3.3–3.3.5) | Mikrobüretten 2, 5 und 10 ml; Röhrchen 25 ml mit Glasstopfen; spektrometrisches Verfahren | — |
| Spektrometer (ISO 6557-2, 3.3.6) | Messung der Absorbanz der Xylolschicht bei 500 nm | — |
Reagenzien, Nährmedien und Verbrauchsmaterialien
| Reagenz | CAS | Details |
|---|---|---|
| Extraktionslösung (ISO 6557-2, 2.2.1) | — | Oxalsäure 2 % (m/m) oder Metaphosphorsäure mit Essigsäure (15 g + 40 ml Eisessig + Wasser auf 500 ml); im Kühlschrank 7–10 Tage |
| 2,6-Dichlorphenolindophenol, Farbstofflösung (ISO 6557-2, 2.2.2) | — | Dinatriumsalz des Farbstoffs, gelöst in heißem Wasser mit Natriumhydrogencarbonat; braune Flasche, Kühlschrank; der Farbstoff zersetzt sich — regelmäßig frische Lösung; der Titer wird mit der Standardlösung bestimmt |
| L-Ascorbinsäure, Standardlösung 1 g/l (ISO 6557-2, 2.2.3) | — | 50 mg aus dem Exsikkator, auf 0,01 mg genau eingewogen, im 50-ml-Kolben mit Extraktionslösung |
| Acetatpuffer pH 4 und Xylol (ISO 6557-2, 3.2.2 und 3.2.5) | — | 300 g wasserfreies Natriumacetat + 700 ml Wasser + 1000 ml Eisessig; Xylol auf Reinheit geprüft — spektrometrisches Verfahren |
| Reagenzien für Prüfungen und Korrekturen (ISO 6557-2, 2.6 und 3.7) | — | Methylenblau 0,05 %, Indigokarmin 0,05 % mit Salzsäure 1 + 3, Hydrochinonlösung, Formaldehyd 40 % |
Arbeitsschutz und Sicherheit
- Xylol wirkt in hohen Konzentrationen narkotisch — alle Arbeiten mit Xylol unter dem Abzug (Warnhinweis in ISO 6557-2, 3.2.5)
- Formaldehyd 40 %, Oxalsäure, Eisessig und Salzsäure bei Korrekturen und Lösungen — Handschuhe, Schutzbrille, Arbeit unter dem Abzug (allgemeiner Grundsatz; den Text der polnischen Norm haben wir nicht gelesen)
- FACHLICHER HINWEIS: das Ergebnis umfasst nur L-Ascorbinsäure — es ist nicht austauschbar mit dem Ergebnis eines Verfahrens, das die Summe aus Ascorbin- und Dehydroascorbinsäure bestimmt (Artikel von 2013)
Häufige Fragen
Welche Norm beschreibt diese Prüfung?
Die Prüfung erfolgt nach PN-A-04019:1998 (polnische Fassung) — „Foodstuffs — Determination of vitamin C content“.
Wie funktioniert diese Methode?
L-Ascorbinsäure reduziert (entfärbt) 2,6-Dichlorphenolindophenol. Beim Titrationsverfahren nach Tillmans wird der Probenextrakt in saurer Lösung mit eingestellter Farbstofflösung bis zur bleibenden Rosafärbung titriert; beim spektrophotometrischen Verfahren wird der Farbstoff im Überschuss zugegeben, der Überschuss in Xylol überführt und bei 500 nm gemessen, und der Farbstoffverbrauch wird aus der Kalibrierkurve abgelesen.
Wie groß sind Messbereich und Genauigkeit?
STATUS (Stand der PKN-Karte am 08.11.2026): PN-A-04019:1998 gültig (polnische Fassung), ohne Rückzugsvermerk; Karte ohne Feld „Wprowadza“ (übernimmt); ersetzte PN-A-75101-11:1990, PN-A-86030:1978, PN-R-87020:1992 und PN-A-79033:1985; Wahl des Verfahrens — Bedingung (PKN-Karte): Titration nach Tillmans — farblose und schwach gefärbte Erzeugnisse; spektrophotometrisch — stark gefärbte Erzeugnisse; Konzentration der Ascorbinsäure in der Prüflösung — Bedingung (ISO 6557-2, 2.4.3.1 und 3.4.3.1; nicht der PN-Text): 0,1–1 mg/ml bei der Titration; 0,05–0,5 mg/ml bei der Spektrometrie; Endpunkt der Titration — Bedingung (ISO 6557-2, 2.4.3.2–2.4.3.3; nicht der PN-Text): lachsrosa Färbung, die mindestens 5 s bestehen bleibt; Portionen mit je etwa 2 mg Ascorbinsäure.
Wie lange dauert die Prüfung?
Das Verfahren umfasst 5 Schritte. Die Norm gibt nicht für jeden Schritt eine Dauer an — maßgeblich ist das Verfahren des Labors.
Welche Geräte werden benötigt?
Analysenwaage und Homogenisator (ISO 6557-2, 2.3.1–2.3.2), Bürette (ISO 6557-2, 2.3.3), Mikrobüretten, Zentrifugenröhrchen und Zentrifuge (ISO 6557-2, 3.3.3–3.3.5), Spektrometer (ISO 6557-2, 3.3.6).
Wo wird diese Prüfung eingesetzt?
Farblose und schwach gefärbte Lebensmittel — Titrationsverfahren nach Tillmans (PKN-Karte); Stark gefärbte Lebensmittel — spektrophotometrisches Verfahren mit Extraktion des Farbstoffüberschusses mit Xylol, 500 nm (PKN-Karte; Artikel von 2013); Ergebnis: Gehalt an L-Ascorbinsäure in mg/100 g (in den Akkreditierungsumfängen auch mg/100 ml) — ohne Dehydroascorbinsäure; In Akkreditierungsumfängen: 6 polnische Laboratorien — Säfte, Nektare, Getränke, Obst- und Gemüseerzeugnisse, Bonbons, Konzentrate, Getreideerzeugnisse, Milch und Milcherzeugnisse, Nahrungsergänzungsmittel, Lebensmittel für besondere Ernährungszwecke.
Welche Sicherheitsmaßnahmen gelten?
Xylol wirkt in hohen Konzentrationen narkotisch — alle Arbeiten mit Xylol unter dem Abzug (Warnhinweis in ISO 6557-2, 3.2.5); Formaldehyd 40 %, Oxalsäure, Eisessig und Salzsäure bei Korrekturen und Lösungen — Handschuhe, Schutzbrille, Arbeit unter dem Abzug (allgemeiner Grundsatz; den Text der polnischen Norm haben wir nicht gelesen); FACHLICHER HINWEIS: das Ergebnis umfasst nur L-Ascorbinsäure — es ist nicht austauschbar mit dem Ergebnis eines Verfahrens, das die Summe aus Ascorbin- und Dehydroascorbinsäure bestimmt (Artikel von 2013).
Welches Labor führt diese Prüfung durch?
Die Prüfung führen nach ISO/IEC 17025 akkreditierte Labore durch. Auf LabCoda finden Sie sie über die Normnummer PN-A-04019.