💊 Mikrobiologische Reinheit von Kosmetika
Kurz gefasst
Prüfung der mikrobiologischen Reinheit kosmetischer Mittel nach ISO 17516. Die Prüfung erfolgt nach PN-EN ISO 17516:2014; TAMC (Augenbereich, Kinder <3 Jahre, Schleimhäute): ≤1 × 10² KBE/g oder mL. Das Verfahren umfasst 10 Schritte (insgesamt rund 8 Tage 1 Std. 17 Min.–16 Tage 1 Std. 17 Min.); eingesetzt wird sie unter anderem für: Qualitätskontrolle fertiger kosmetischer Mittel (Cremes, Lotionen, Shampoos), Prüfung kosmetischer Rohstoffe (Pflanzenextrakte, Blütenwässer), Reinheitskontrolle von Verpackungen und Verpackungsmaterialien.
Auf einen Blick
- Norm: PN-EN ISO 17516:2014
- Kategorie: Pharmazie und Kosmetik
- Verfahrensschritte: 10
- Gesamtdauer der Schritte: 8 Tage 1 Std. 17 Min.–16 Tage 1 Std. 17 Min.
- TAMC (allgemeine Produkte): ≤1 × 10³ KBE/g oder mL
- TAMC (Augenbereich, Kinder <3 Jahre, Schleimhäute): ≤1 × 10² KBE/g oder mL
- Pathogene — Abwesenheit in 0,1 g/mL: E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, C. albicans
Übersicht
Die mikrobiologische Reinheit ist einer der wichtigsten Sicherheitsparameter kosmetischer Mittel. Die Norm PN-EN ISO 17516 legt mikrobiologische Grenzwerte für Kosmetika fest und stellt sicher, dass die Produkte keine übermäßige Anzahl von Mikroorganismen und keine bestimmten pathogenen Mikroorganismen enthalten, die die Produktqualität oder die Sicherheit der Verbraucher beeinträchtigen könnten.
Die Norm definiert zwei Produktkategorien mit unterschiedlichen Grenzwerten. Für Produkte zur allgemeinen Anwendung (Körpercremes, Shampoos, Duschgele) beträgt die zulässige Zahl aerober mesophiler Mikroorganismen ≤1×10³ KBE/g (oder mL). Für Produkte zur Anwendung im Augenbereich, bei Kindern unter 3 Jahren und auf Schleimhäuten ist der Grenzwert auf ≤1×10² KBE/g (oder mL) verschärft. In beiden Kategorien ist die Abwesenheit der Pathogene Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus und Candida albicans in 0,1 g (oder 0,1 mL) Produkt gefordert.
Mikrobiologische Prüfungen von Kosmetika werden nach einer Reihe begleitender Normen durchgeführt: ISO 21148 (allgemeine Anweisungen für mikrobiologische Prüfungen), ISO 21149 (Bestimmung mesophiler aerober Bakterien), ISO 22717 (Pseudomonas aeruginosa), ISO 22718 (Staphylococcus aureus), ISO 18416 (Candida albicans) und ISO 16212 (Hefen und Schimmelpilze). Diese Verfahren beschreiben Probenvorbereitung, Wahl der Nährmedien, Bebrütungsbedingungen und Auswertung der Ergebnisse.
Der Kosmetikhersteller ist dafür verantwortlich, die mikrobiologische Reinheit des Produkts während der gesamten Haltbarkeitsdauer sicherzustellen. Regelmäßige mikrobiologische Prüfungen sind Teil des Qualitätssicherungssystems, das die Verordnung (EG) Nr. 1223/2009 über kosmetische Mittel verlangt.
Prinzip der Methode
Die Prüfung besteht darin, eine repräsentative Probe des kosmetischen Mittels zu entnehmen, sie in einer Verdünnungslösung zu suspendieren (Pepton-Salz-Puffer mit Tensid zur Neutralisierung der Konservierungsmittel — z. B. Tween 80, Lecithin, Natriumthiosulfat) und anschließend auf geeignete Nährmedien auszuimpfen. Die Gesamtkeimzahl (TAMC — Total Aerobic Microbial Count) wird mit dem Plattenverfahren (Guss- oder Spatelverfahren) auf Casein-Soja-Agar (TSA) bestimmt, Bebrütung 48–72 h bei 30–35 °C. Hefen und Schimmelpilze (TYMC) werden auf Sabouraud-Agar mit Chloramphenicol 5–7 Tage bei 20–25 °C kultiviert. Pathogene werden durch Anreicherung in Selektivmedien (MacConkey, Cetrimid, Baird-Parker, SDA) mit biochemischer Bestätigung oder API/Vitek-Test nachgewiesen.
Anwendungen
- Qualitätskontrolle fertiger kosmetischer Mittel (Cremes, Lotionen, Shampoos)
- Prüfung kosmetischer Rohstoffe (Pflanzenextrakte, Blütenwässer)
- Reinheitskontrolle von Verpackungen und Verpackungsmaterialien
- Umgebungsmonitoring der Produktion (kosmetische GMP)
- Prüfungen der mikrobiologischen Stabilität im Rahmen der Haltbarkeitsbewertung
- Überprüfung der Wirksamkeit von Desinfektions- und Reinigungsprozessen der Produktionslinien
- Sicherheitsbewertung von Produkten im Rahmen des Safety Assessment (Verordnung 1223/2009)
- Reklamationsprüfungen — Analyse der Ursachen mikrobiologischer Kontamination
Schlüsselparameter
| Parameter | Wert |
|---|---|
| TAMC (allgemeine Produkte) | ≤1 × 10³ KBE/g oder mL |
| TAMC (Augenbereich, Kinder <3 Jahre, Schleimhäute) | ≤1 × 10² KBE/g oder mL |
| Pathogene — Abwesenheit in 0,1 g/mL | E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, C. albicans |
| Bebrütungstemperatur (Bakterien) | 30–35 °C, 48–72 h |
| Bebrütungstemperatur (Pilze) | 20–25 °C, 5–7 Tage |
| Probenmenge | 1 g oder 1 mL (mit Verdünnung 1:10) |
Norm
- Normnummer
- PN-EN ISO 17516:2014
- Titel (PL)
- Kosmetyki — Mikrobiologia — Limity mikrobiologiczne
- Title (EN)
- Cosmetics — Microbiology — Microbiological limits
Schritt-für-Schritt-Verfahren
-
Probenahme und Probenvorbereitung
1 g (oder 1 mL) des kosmetischen Mittels aseptisch entnehmen. In einen Stomacher-Beutel mit 9 mL Verdünnungslösung mit Neutralisationsmitteln überführen.
-
Homogenisierung
Probe im Stomacher homogenisieren (1–2 min, 230 rpm) oder kräftig schütteln. Eine gleichmäßige Suspension 1:10 herstellen.
-
Bestimmung der TAMC (aerobe mesophile Bakterien)
1 mL der Suspension 1:10 auf TSA-Platten ausimpfen (Guss- oder Spatelverfahren). Doppelt ansetzen. 48–72 h bei 30–35 °C bebrüten.
-
Bestimmung der TYMC (Hefen und Schimmelpilze)
1 mL der Suspension 1:10 auf SDA-Platten + Chloramphenicol ausimpfen. 5–7 Tage bei 20–25 °C bebrüten.
-
Nachweis von E. coli
1 mL der Suspension in 9 mL MacConkey-Bouillon überführen. 24–48 h bei 30–35 °C bebrüten. Auf MacConkey-Agar ausstreichen. Biochemisch bestätigen.
-
Nachweis von P. aeruginosa
Anreicherung in Cetrimid-Bouillon, 24–48 h, 30–35 °C. Ausstrich auf Cetrimid-Agar. Bestätigen (Oxidase+, Pigment, API/Vitek).
-
Nachweis von S. aureus
Anreicherung in Casein-Soja-Bouillon, 24–48 h, 30–35 °C. Ausstrich auf Baird-Parker-Agar. Bestätigen (Koagulase+, Katalase+).
-
Nachweis von C. albicans
Anreicherung in Sabouraud-Bouillon, 48 h, 30–35 °C. Ausstrich auf SDA-Agar. Bestätigen (Keimschlauchtest, API AUX/ID32C).
-
Ablesen und Berechnung der Ergebnisse
Kolonien auf den TAMC- und TYMC-Platten zählen. KBE/g = Koloniezahl × Verdünnung berechnen. An-/Abwesenheit der Pathogene bewerten. Mit den Grenzwerten der ISO 17516 vergleichen.
-
Bericht und Konformitätsbewertung
Bericht mit den Ergebnissen erstellen: TAMC, TYMC, Pathogene (vorhanden/nicht vorhanden). Konformitätsbewertung nach ISO 17516 abgeben. Labordokumentation aufbewahren.
Erforderliche Geräte und Apparatur
| Gerät | Beispiel | Richtpreis |
|---|---|---|
| Sicherheitswerkbank Klasse II | Thermo Fisher MSC-Advantage, Esco Labculture, FASTER BH-EN | 25 000–60 000 PLN |
| Bakteriologischer Brutschrank 30–35 °C | Memmert IN110, Binder BD115, POL-EKO CLN 53 | 8 000–20 000 PLN |
| Mykologischer Brutschrank 20–25 °C | Memmert IPP110, Binder KB115, mit Peltier-Kühlung | 10 000–25 000 PLN |
| Laborautoklav | Tuttnauer 3870ELV, Systec VX-75, 121 °C / 15 min | 20 000–60 000 PLN |
| Analysenwaage (0,01 g) | Mettler Toledo ME204, Sartorius Quintix 224 | 5 000–12 000 PLN |
| Stomacher / Homogenisator | Seward Stomacher 400, BagMixer 400 | 10 000–25 000 PLN |
| Koloniezähler | Interscience Scan 300/500, BZG 30 Koloniezähler | 5 000–20 000 PLN |
Reagenzien, Nährmedien und Verbrauchsmaterialien
| Reagenz | CAS | Details |
|---|---|---|
| Casein-Soja-Agar (TSA) | 91079-40-2 | Nährmedium zur Bestimmung der TAMC, Fertigplatten oder Pulver zur Zubereitung, Packung 500 g |
| Sabouraud-Agar mit Chloramphenicol (SDA) | — | Nährmedium zur Bestimmung von Hefen und Schimmelpilzen (TYMC), Bebrütung 20–25 °C, 5–7 Tage |
| Verdünnungspuffer mit Neutralisationsmitteln | — | Pepton-Salz-Lösung + Tween 80 (3 %) + Lecithin (0,3 %) + Natriumthiosulfat (0,5 %) — Neutralisierung der Konservierungsmittel |
| MacConkey-Agar | — | Selektivmedium zum Nachweis von E. coli und Enterobakterien |
| Cetrimid-Agar | — | Selektivmedium zum Nachweis von Pseudomonas aeruginosa |
| Baird-Parker-Agar | — | Selektivmedium zum Nachweis von Staphylococcus aureus, mit Eigelbemulsion und Kaliumtellurit |
| Sabouraud-Dextrose-Agar (SDA) | — | Nährmedium zum Nachweis von Candida albicans, mit Chloramphenicol |
| Stomacher-Beutel | — | Sterile Filterbeutel zur Homogenisierung der Proben, Einweg |
Arbeitsschutz und Sicherheit
- Arbeit mit Mikroorganismen — Sicherheitswerkbank Klasse II verpflichtend, Schutzstufe BSL-1/BSL-2
- Pathogene (P. aeruginosa, S. aureus, E. coli) — Infektionsgefahr, Nitrilhandschuhe, Händedesinfektion
- Biologische Abfälle vor der Entsorgung autoklavieren (121 °C, 15 min)
- Arbeitsflächen mit 70%igem Alkohol oder Natriumhypochloritlösung desinfizieren
- Schutzbrille und Laborkittel sind Pflicht
Häufige Fragen
Welche Norm beschreibt diese Prüfung?
Die Prüfung erfolgt nach PN-EN ISO 17516:2014 — „Cosmetics — Microbiology — Microbiological limits“.
Wie funktioniert diese Methode?
Die Prüfung besteht darin, eine repräsentative Probe des kosmetischen Mittels zu entnehmen, sie in einer Verdünnungslösung zu suspendieren (Pepton-Salz-Puffer mit Tensid zur Neutralisierung der Konservierungsmittel — z. B.
Wie groß sind Messbereich und Genauigkeit?
TAMC (allgemeine Produkte): ≤1 × 10³ KBE/g oder mL; TAMC (Augenbereich, Kinder <3 Jahre, Schleimhäute): ≤1 × 10² KBE/g oder mL; Pathogene — Abwesenheit in 0,1 g/mL: E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, C. albicans; Bebrütungstemperatur (Bakterien): 30–35 °C, 48–72 h.
Wie lange dauert die Prüfung?
Die für die einzelnen Schritte angegebenen Zeiten ergeben zusammen rund 8 Tage 1 Std. 17 Min.–16 Tage 1 Std. 17 Min. Das Verfahren umfasst 10 Schritte.
Welche Geräte werden benötigt?
Sicherheitswerkbank Klasse II, Bakteriologischer Brutschrank 30–35 °C, Mykologischer Brutschrank 20–25 °C, Laborautoklav, Analysenwaage (0,01 g), Stomacher / Homogenisator, Koloniezähler. Richtpreis für das Kerngerät (Sicherheitswerkbank Klasse II): 25 000–60 000 PLN.
Wo wird diese Prüfung eingesetzt?
Qualitätskontrolle fertiger kosmetischer Mittel (Cremes, Lotionen, Shampoos); Prüfung kosmetischer Rohstoffe (Pflanzenextrakte, Blütenwässer); Reinheitskontrolle von Verpackungen und Verpackungsmaterialien; Umgebungsmonitoring der Produktion (kosmetische GMP); Prüfungen der mikrobiologischen Stabilität im Rahmen der Haltbarkeitsbewertung; Überprüfung der Wirksamkeit von Desinfektions- und Reinigungsprozessen der Produktionslinien; Sicherheitsbewertung von Produkten im Rahmen des Safety Assessment (Verordnung 1223/2009); Reklamationsprüfungen — Analyse der Ursachen mikrobiologischer Kontamination.
Welche Sicherheitsmaßnahmen gelten?
Arbeit mit Mikroorganismen — Sicherheitswerkbank Klasse II verpflichtend, Schutzstufe BSL-1/BSL-2; Pathogene (P. aeruginosa, S. aureus, E. coli) — Infektionsgefahr, Nitrilhandschuhe, Händedesinfektion; Biologische Abfälle vor der Entsorgung autoklavieren (121 °C, 15 min); Arbeitsflächen mit 70%igem Alkohol oder Natriumhypochloritlösung desinfizieren; Schutzbrille und Laborkittel sind Pflicht.
Welches Labor führt diese Prüfung durch?
Die Prüfung führen nach ISO/IEC 17025 akkreditierte Labore durch. Auf LabCoda finden Sie sie über die Normnummer PN-EN ISO 17516.