🍎 Konservierungsstoffe (Sorbate, Benzoate) — HPLC
Kurz gefasst
Bestimmung von Sorbinsäure und Benzoesäure (Konservierungsstoffe E200, E210) in Lebensmitteln mittels HPLC-UV. Die Prüfung erfolgt nach PN-EN 12856:2001; Messbereich: 5–5000 mg/kg. Das Verfahren umfasst 5 Schritte (insgesamt rund 1 Std. 5 Min.); eingesetzt wird sie unter anderem für: Kontrolle der Konservierungsstoffverwendung in Lebensmitteln (EU-VO 1333/2008), Analyse von Erfrischungsgetränken und Säften, Analyse von Obstprodukten (Marmeladen, Konfitüren).
Auf einen Blick
- Norm: PN-EN 12856:2001
- Kategorie: Lebensmittelchemie
- Verfahrensschritte: 5
- Gesamtdauer der Schritte: 1 Std. 5 Min.
- Bestimmte Substanzen: Sorbinsäure (E200), Benzoesäure (E210)
- Messbereich: 5–5000 mg/kg
- Nachweisgrenze: 2 mg/kg
Übersicht
Sorbinsäure (E200) und Benzoesäure (E210) sowie ihre Salze sind die am häufigsten verwendeten Konservierungsstoffe in Lebensmitteln. Ihre zulässigen Konzentrationen sind in EU-VO 1333/2008 geregelt: Sorbinsäure 150–2000 mg/kg (je nach Produktkategorie), Benzoesäure 150–2000 mg/kg.
Die HPLC-UV-Methode umfasst die Extraktion von Konservierungsstoffen aus der Lebensmittelprobe, Reinigung, Trennung an C18-Säule und UV-Detektion: Sorbinsäure 255 nm, Benzoesäure 228 nm. Die Methode ist einfach, schnell und selektiv.
Prinzip der Methode
Die Probe wird mit Wasser homogenisiert, mittels Ultraschall extrahiert und mit Carrez-Reagenzien enteiweißt. Nach Filtration (0,22 µm) wird die Lösung mittels HPLC an C18-Säule mit gepufferter mobiler Phase (Ammoniumacetat pH 4,2 + Methanol) analysiert. UV-Detektion bei 228 nm (Benzoesäure) und 255 nm (Sorbinsäure). Quantitative Bestimmung über Kalibrierkurve.
Anwendungen
- Kontrolle der Konservierungsstoffverwendung in Lebensmitteln (EU-VO 1333/2008)
- Analyse von Erfrischungsgetränken und Säften
- Analyse von Obstprodukten (Marmeladen, Konfitüren)
- Qualitätskontrolle von Milchprodukten (Käse, Joghurt)
- Analyse von Soßen, Dressings und Marinaden
- Nachweis nicht deklarierter Konservierungsstoffe
Schlüsselparameter
| Parameter | Wert |
|---|---|
| Bestimmte Substanzen | Sorbinsäure (E200), Benzoesäure (E210) |
| Messbereich | 5–5000 mg/kg |
| Nachweisgrenze | 2 mg/kg |
| Wellenlänge | 228 nm (Benzoesäure), 255 nm (Sorbinsäure) |
| Präzision (CV) | 2–5% |
Norm
- Normnummer
- PN-EN 12856:2001
- Titel (PL)
- Artykuły żywnościowe — Oznaczanie kwasu sorbowego i benzoesowego metodą HPLC
- Title (EN)
- Foodstuffs — Determination of acesulfame-K, aspartame and saccharin — HPLC method
Schritt-für-Schritt-Verfahren
-
Extraktion
5 g Probe einwiegen, 40 mL Wasser zugeben, 15 min Ultraschall. Mit Carrez I+II enteiweißen. Auf 50 mL auffüllen.
-
Filtration
Durch 0,22 µm PVDF in Vial filtrieren.
-
Kalibrierung
Standards: 5, 10, 50, 100, 500 mg/L Gemisch aus Sorbin- und Benzoesäure.
-
HPLC-Analyse
C18, 20 mM Ammoniumacetat pH 4,2 / MeOH Gradient, 1 mL/min, UV 228+255 nm.
-
Berechnungen
Konzentration aus Kalibrierkurve, Umrechnung in mg/kg Produkt.
Erforderliche Geräte und Apparatur
| Gerät | Beispiel | Richtpreis |
|---|---|---|
| HPLC-System mit UV/DAD-Detektor | Agilent 1260, Shimadzu Nexera, Waters Alliance | 200 000–400 000 PLN |
| C18-Säule | Agilent Zorbax Eclipse Plus C18, 150×4,6 mm, 5 µm | 1 500–3 500 PLN |
| Ultraschallbad | Bandelin Sonorex RK 510 | 3 000–8 000 PLN |
| Spritzenfilter 0,22 µm | PVDF oder Nylon, ø 13 mm | 1–3 PLN/Stk. |
Reagenzien, Nährmedien und Verbrauchsmaterialien
| Reagenz | CAS | Details |
|---|---|---|
| Sorbinsäure (Standard) | 110-44-1 | Reinheit ≥99%, CRM |
| Benzoesäure (Standard) | 65-85-0 | Reinheit ≥99,5%, CRM |
| Ammoniumacetat | 631-61-8 | Mobile Phase: 20 mmol/L, pH 4,2 |
| Methanol HPLC grade | 67-56-1 | Mobiler-Phase-Bestandteil (Gradient 10–60%) |
Arbeitsschutz und Sicherheit
- Methanol — giftig, entzündlich. Abzug obligatorisch.
- Sorbinsäure — reizend, Nitrilhandschuhe
- HPLC-Abfall — Behälter für organischen Abfall
Häufige Fragen
Welche Norm beschreibt diese Prüfung?
Die Prüfung erfolgt nach PN-EN 12856:2001 — „Foodstuffs — Determination of acesulfame-K, aspartame and saccharin — HPLC method“.
Wie funktioniert diese Methode?
Die Probe wird mit Wasser homogenisiert, mittels Ultraschall extrahiert und mit Carrez-Reagenzien enteiweißt. Nach Filtration (0,22 µm) wird die Lösung mittels HPLC an C18-Säule mit gepufferter mobiler Phase (Ammoniumacetat pH 4,2 + Methanol) analysiert.
Wie groß sind Messbereich und Genauigkeit?
Bestimmte Substanzen: Sorbinsäure (E200), Benzoesäure (E210); Messbereich: 5–5000 mg/kg; Nachweisgrenze: 2 mg/kg; Wellenlänge: 228 nm (Benzoesäure), 255 nm (Sorbinsäure).
Wie lange dauert die Prüfung?
Die für die einzelnen Schritte angegebenen Zeiten ergeben zusammen rund 1 Std. 5 Min. Das Verfahren umfasst 5 Schritte.
Welche Geräte werden benötigt?
HPLC-System mit UV/DAD-Detektor, C18-Säule, Ultraschallbad, Spritzenfilter 0,22 µm. Richtpreis für das Kerngerät (HPLC-System mit UV/DAD-Detektor): 200 000–400 000 PLN.
Wo wird diese Prüfung eingesetzt?
Kontrolle der Konservierungsstoffverwendung in Lebensmitteln (EU-VO 1333/2008); Analyse von Erfrischungsgetränken und Säften; Analyse von Obstprodukten (Marmeladen, Konfitüren); Qualitätskontrolle von Milchprodukten (Käse, Joghurt); Analyse von Soßen, Dressings und Marinaden; Nachweis nicht deklarierter Konservierungsstoffe.
Welche Sicherheitsmaßnahmen gelten?
Methanol — giftig, entzündlich. Abzug obligatorisch.; Sorbinsäure — reizend, Nitrilhandschuhe; HPLC-Abfall — Behälter für organischen Abfall.
Welches Labor führt diese Prüfung durch?
Die Prüfung führen nach ISO/IEC 17025 akkreditierte Labore durch. Auf LabCoda finden Sie sie über die Normnummer PN-EN 12856.