🍎 Bestimmung geringer Rückstände von Dithiocarbamat-Fungiziden und Thiuramdisulfid in fettarmen Lebensmitteln als Summe, angegeben als Schwefelkohlenstoff — die Prüfmenge (bis 200 g, Säuglingsnahrung 400 g) wird 30 min mit Zinn(II)-chlorid-Lösung in Salzsäure gekocht, das freigesetzte CS2 wird in Waschflaschen mit Natronlauge und Schwefelsäure gereinigt, in methanolischer Kaliumhydroxidlösung als Kaliumxanthogenat absorbiert und dessen Absorption bei 302 nm mit Korrektur bei 272 und 332 nm gemessen; Kalibrierkurve 1–40 µg CS2, PN-EN 12396-3

Lebensmittelchemie PN-EN 12396-3

Übersicht

WAS DIE NORM BESCHREIBT. Den Normtext lesen wir in der iTeh-Leseprobe der SIST EN 12396-3:2001 (englischer Text der EN 12396-3:2000, Scan): vom Titelblatt über Inhaltsverzeichnis, Vorwort und die Abschnitte 1–7 bis 8.4.3 (spektrometrische Messung und Gleichung (1) zur Absorptionskorrektur) auf Seite 7. Außerhalb der Leseprobe bleiben die Angabe der Ergebnisse (9), Bestätigungsprüfungen (10), Präzision (11), Prüfbericht (12), Anhang A (Präzisionsdaten) und das Literaturverzeichnis.

NACH DEM TEXT DER EN 12396-3:2000. Die Norm wurde vom CEN/TC 275 „Lebensmittelanalytik — Horizontale Verfahren“ erarbeitet, dessen Sekretariat DIN innehat; CEN nahm sie am 08.04.2000 an, die nationale Umsetzung hatte spätestens im November 2000 zu erfolgen. EN 12396 besteht aus drei Teilen: 1 — spektrometrisches Verfahren, 2 — gaschromatographisches Verfahren, 3 — UV-spektrometrisches Xanthogenat-Verfahren. Anwendungsbereich (1): UV-spektrometrisches Verfahren zur Bestimmung geringer Rückstände von Dithiocarbamat- und Thiuramdisulfid-Fungiziden als Xanthogenat; diese Verbindungen setzen unter festgelegten Bedingungen Schwefelkohlenstoff frei (z. B. Mancozeb, Maneb, Propineb, Thiram, Zineb); das Verfahren ist vor allem für jene Lebensmittel pflanzlichen Ursprungs anwendbar, für die niedrige Rückstandshöchstgehalte festgelegt sind; quantifiziert werden kann nur die ganze Gruppe, einzelne Verbindungen werden nicht identifiziert; Rückstandshöchstgehalte (MRL) werden in der Regel als Schwefelkohlenstoff angegeben. Verweisungen (2): ISO 1750 (Common Names von Pestiziden), EN 12393-1:1998, EN 12396-1:1998, EN 12396-2:1998. Prinzip (3): Die Probe wird mit Salzsäure und Zinn(II)-chlorid erhitzt, um aus vorhandenen Dithiocarbamaten und/oder Thiuramdisulfiden Schwefelkohlenstoff freizusetzen; CS2 wird durch Destillation abgetrennt und gereinigt und in methanolischer Kaliumhydroxidlösung aufgefangen, wo es Kaliumxanthogenat bildet; die Absorption des Produkts wird bei 302 nm mit Basislinienkorrektur bei 272 und 332 nm gemessen und der Massenanteil der Rückstände in Milligramm Schwefelkohlenstoff je Kilogramm Lebensmittel angegeben. Reagenzien (4): Reagenzien anerkannter Analysenqualität, vorzugsweise für die Pestizidrückstandsanalyse, destilliertes oder entmineralisiertes Wasser; eine Kontamination von Wasser, Lösemitteln und anorganischen Salzen durch Kunststoffe und Gummi ist zu vermeiden — für Lagerung und Handhabung von Wasser und Reagenzien werden nur Glasgefäße verwendet; Schwefelkohlenstoff mindestens 99 % (bei −20 °C 2–3 Jahre stabil), Methanol, konzentrierte Salzsäure (1,16 g/ml), konzentrierte Schwefelsäure (1,84 g/ml), Natronlauge 100 g/l, methanolische Kaliumhydroxidlösungen I (28 g/l) und II (56 g/l), Zinn(II)-chlorid-Lösung 40 g/100 ml in konzentrierter Salzsäure, Arbeitslösung Zinn(II)-chlorid–Salzsäure 3,3 g/100 ml (20 ml Zinnchloridlösung, 20 ml konzentrierte Salzsäure und vorsichtig 200 ml Wasser); CS2-Stammlösung — etwa 1 ml (etwa 1,25 g) Schwefelkohlenstoff in einen 50-ml-Kolben mit 40 ml Methanol, vor und nach der Zugabe auf 10 mg genau gewogen, mit Methanol aufgefüllt; Standardlösung — Verdünnungen 1 : 25 und 1 : 100, 1 ml ≈ 10 µg CS2; beide werden für jede Kalibrierkurve frisch hergestellt. Geräte (5): gründlich gereinigte Glasgeräte (Reinigung nach 5.1 der prEN 12393-1:1998); Zersetzungs- und Destillationsapparatur (Bild 1) — 1-l- oder 2-l-Dreihals-Rundkolben oder zylindrischer Kolben mit Dreihalsaufsatz, Tropftrichter, Gaseinleitungsrohr, aufsteigender Liebigkühler und vier über Kugelschliffe verbundene Absorptionsrohre, die beiden letzten vorzugsweise mit Widmer-Spirale; Durchflussmesser; Heizhaube mindestens 450 W oder Gasbrenner mit Babotrichter; Spektrometer für 270–350 nm mit 1-cm-Quarzküvetten, vorzugsweise Zweistrahlgerät; Niedervakuumpumpe am letzten Absorptionsrohr oder Stickstoffquelle unter Druck am Einleitungsrohr. Probenahme (6): Die Laboratoriumsprobe wird nach einem allgemein empfohlenen Verfahren so vorbereitet, dass ein repräsentativer Teil erhalten wird; nach einer Anmerkung enthält die Richtlinie 79/700/EWG Probenahmeverfahren für die amtliche Kontrolle von Pestizidrückständen in Obst und Gemüse. Probenvorbereitung (7): Gefroren eingehende Proben werden bei −20 °C gelagert; frische Proben werden möglichst sofort nach Eingang untersucht, völlig oder weitgehend verdorbene Proben nicht; nur der Teil, für den der Rückstandshöchstgehalt gilt, wird verwendet, und entfernte Pflanzenteile werden protokolliert; ist keine sofortige Analyse möglich, wird die Probe bei 0–5 °C höchstens 2 Tage gelagert, bei längerer Lagerung bei −20 °C tiefgefroren in Portionen für je eine Analyse; die Verkleinerung soll repräsentative Teile liefern (z. B. Vierteln und Auswahl gegenüberliegender Viertel; kleine Einheiten — gründliches Mischen; großes Obst und Gemüse — keilförmige Abschnitte, Gurken — Querscheiben einschließlich der Außenfläche jeder Einheit); nach einer Anmerkung zersetzen sich Rückstände von Dithiocarbamaten und Thiuramdisulfiden auf der Oberfläche der Pflanzenteile, die nicht systemisch sind, rasch, besonders in zerkleinerten Proben. Prüfmenge (7.2): bis 200 g, auf ± 1 % gewogen; störende Teile werden nach dem Wägen entfernt (z. B. Steine von Steinobst), Berechnungsgrundlage ist die Masse der ursprünglichen Prüfmenge (mit Steinen); die Prüfmenge wird nicht kleiner geschnitten, als nötig ist, damit sie durch den Kolbenhals passt, weil die Rückstände umso stärker abnehmen, je mehr geschnitten wird; nach dem Schneiden wird sofort analysiert. Durchführung (8): Warnung — viele Dithiocarbamate, Thiuramdisulfide und Schwefelkohlenstoff sind auf verschiedenen Expositionswegen giftig, besonders in konzentrierter Form (Sicherheitsdatenblätter des Herstellers); Dämpfe einiger Lösemittel sind giftig und werden leicht über die Haut aufgenommen — wirksame Abzüge (8.1). Blindwerte (8.2): Reagenzien- und Matrixblindwerte sowie Wiederfindungsversuche mit Dotierung auf Höhe der Rückstandshöchstgehalte, die zufriedenstellende Ergebnisse liefern müssen; die Absorption des Reagenzienblindwerts bei 302 nm gegen KOH-Lösung I muss null oder nahe null sein; nach Anmerkungen sollte der Analytiker das Verfahren vor der Analyse sicher beherrschen, und manche Gemüse (z. B. Kreuzblütler) enthalten natürliche Verbindungen, die unter den Bedingungen der Norm CS2 freisetzen, was zu falsch positiven Ergebnissen führen kann. Kalibrierkurve (8.3): je 5 ml KOH-Lösung II in sechzehn 10-ml-Messkolben, je zwei Kolben mit 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,2; 1,6; 2 und 4 ml Standardlösung (1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 und 40 µg CS2), mit Methanol aufgefüllt, 45 min stehen lassen, Messung wie in 8.4.3; die Kurve muss im Bereich 1–40 µg CS2 linear sein — sonst wird aus frischen Mischungen eine neue erstellt; statt einer grafischen Darstellung kann eine Regression über die 16 Werte verwendet werden. Vorbereitung der Apparatur (8.4.1): erstes Absorptionsrohr — 20 ml Natronlauge, zweites — 20 ml Schwefelsäure, drittes und viertes (mit Widmer-Spirale) — je 8 ml KOH-Lösung I, mit Eiswasser gekühlt, um Methanolverluste zu vermeiden; nach einer Anmerkung dient das vierte Rohr der Kontrolle der vollständigen Absorption von CS2; Stickstoff- oder Luftstrom etwa 150 ml/min durch die Rohre. Zersetzung und Destillation (8.4.2): Prüfmenge bis 200 g (400 g bei Säuglingsnahrung) im Kolben, Apparatur ohne CS2-Verluste verschlossen, 240 ml Zinn(II)-chlorid–Salzsäure-Lösung über den Tropftrichter (bei voluminösem Material wie Salat mehr, damit die Prüfmenge vollständig bedeckt ist); rasches Erhitzen zum Sieden — besonders bei tiefgefrorenem Material wird die Lösung vor der vorsichtigen Zugabe zum Sieden erhitzt — und insgesamt 30 min Sieden; danach werden die KOH-Rohre abgenommen und der Gasstrom abgestellt. Messung (8.4.3): Der Inhalt des dritten und vierten Rohrs wird getrennt in 10-ml-Messkolben überführt, mit KOH-Lösung I nachgespült, damit aufgefüllt und nach 15 min wird die Lösung aus dem dritten Rohr bei 272, 302 und 332 nm in einer 1-cm-Küvette gegen KOH-Lösung I gemessen; korrigierte Absorption A_corr = A302 − (A272 + A332)/2.

STATUS (Stand 03.10.2026). Die PKN-Suche (Suchbegriff „PN-EN 12396-3“, 03.10.2026) liefert ein Ergebnis: PN-EN 12396-3:2002 (polnische Fassung, „Wprowadza: EN 12396-3:2000 [IDT]“) ohne Zurückziehungsvermerk. Im iTeh-Katalog (abgerufen 03.10.2026) hat EN 12396-3:2000 den Status „Published“, Stufe 90.93 (Entscheidung zur Bestätigung der Norm).

WIE VIELE LABORATORIEN UND IN WELCHER FORM (Kopie der Datenbank der Akkreditierungsumfänge, Stand bis 17.09.2026, abgerufen 03.10.2026). Die Nummer 12396-3 steht in 5 Datensätzen bei 5 Laboratorien: AB 492, AB 519, AB 1205, AB 1334, AB 1748. In den aktuellen PCA-Dokumenten (abgerufen 03.10.2026, Ausgaben vom 26.11.2025 bis 03.07.2026) steht die Nummer in 5 Zeilen — je eine bei jedem; in jedem der fünf Dokumente entspricht die Zahl der Seitenmarken der Zahl der PDF-Seiten, ohne Wiederholungen; die Durchsuchung aller 1291 am 03.10.2026 aus dem BIP heruntergeladenen PCA-Dokumente ergab keine Laboratorien außerhalb der Datenbankkopie (17 Laboratorien des Verzeichnisses haben im BIP keinen Link zum Umfangsdokument). Form „PN-EN 12396-3:2002“ (AB 492, AB 519, AB 1205, AB 1748) sowie „PN-EN 12396- 3:2002“ mit Leerzeichen nach dem Bindestrich (AB 1334). Keine dieser Positionen ist ausgesetzt. Der Reiter „Laboratorien“ (Suchbegriff „PN-EN 12396-3“) zeigt 4 Laboratorien — alle außer AB 1334, bei dem die Nummer mit Leerzeichen geschrieben ist — geprüft mit einer Abfrage des Reiters auf dem Produktivserver labcoda.pl am 03.10.2026.

WAS DIE LABORATORIEN PRÜFEN (Positionen bei PCA). Prüfgegenstand: Lebensmittel pflanzlichen Ursprungs, landwirtschaftliche Erzeugnisse — mit hohem Wassergehalt, mit hohem Säure- und Wassergehalt, mit hohem Stärke- und/oder Proteingehalt sowie niedrigem Wasser- und Fettgehalt (AB 492); Proben von Lebensmitteln pflanzlichen Ursprungs — mit hohem Wassergehalt, mit hohem Säure- und hohem Wassergehalt, mit hohem Stärke- und/oder Proteingehalt sowie niedrigem Protein- und Fettgehalt (so bei PCA) — sowie Getreideerzeugnisse für Kinder (AB 519); Lebensmittel pflanzlichen Ursprungs, Obst und Gemüse mit hohem Wassergehalt, Obst mit hohem Säure- und Wassergehalt, Lebensmittel mit hohem Stärke- und/oder Proteingehalt sowie niedrigem Wasser- und Fettgehalt (AB 1205); Obst und Gemüse, frisch oder gefroren (AB 1334); Lebensmittel (AB 1748, Position im flexiblen Akkreditierungsumfang). Merkmal: Dithiocarbamat-Rückstände, angegeben als bzw. umgerechnet auf CS2 (AB 492, AB 519 — zusammen mit Thiuramdisulfid, AB 1334, AB 1748 — „Dithiocarbamate (Thiuramdisulfid)“), Rückstände von Pestiziden der Dithiocarbamatgruppe (AB 1205). Bereiche: (0,01–0,80) mg/kg (AB 492), (0,01–0,2) mg/kg CS2 (AB 519), (0,03–2,0) mg/kg (AB 1205), (0,025–7,500) mg/kg (AB 1334); AB 1748 gibt keinen Bereich an. Technik: spektrophotometrisches Verfahren (AB 492, AB 519, AB 1748), UV-spektrophotometrisches Verfahren (AB 1205, AB 1334).

WO EIN SCHEINBAR RICHTIGES ERGEBNIS LEICHT ENTSTEHT. Bei der Probe: Oberflächenrückstände zersetzen sich rasch, besonders nach dem Zerkleinern — die Prüfmenge wird nicht feiner geschnitten, als der Kolbenhals erfordert, und nach dem Schneiden sofort analysiert (7.1, 7.2). Bei der Lagerung: 0–5 °C höchstens 2 Tage, länger nur tiefgefroren in Portionen für eine Analyse (7.1). Bei der Masse: Berechnungsgrundlage ist die Masse vor dem Entfernen der Steine (7.2). Bei der Matrix: Kreuzblütlergemüse kann selbst CS2 freisetzen und falsch positive Ergebnisse liefern (8.2, Anmerkung 2). Bei Glasgeräten und Reagenzien: nur Glasgefäße, kein Kontakt mit Kunststoff und Gummi (4.1). Bei der Absorption: Das vierte Rohr prüft, ob CS2 vollständig absorbiert wurde; die KOH-Rohre werden mit Eiswasser gekühlt (8.4.1). Bei der Kalibrierung: Linearität 1–40 µg CS2, frische Standards für jede Kurve (4.11, 4.12, 8.3). Beim Ergebnis: Das Verfahren liefert die Gruppensumme als CS2, ohne Angabe, welche Verbindung vorlag (1).

WAS WIR NICHT ANGEBEN. Die Berechnung des Ergebnisses (9), die Bestätigungsprüfungen (10), die Präzisionsdaten (11, Anhang A) und die Anforderungen an den Prüfbericht (12) haben wir nicht gelesen. Rückstandshöchstgehalte geben wir nicht an.

Prinzip der Methode

Eine Lebensmittelprüfmenge (bis 200 g) wird 30 min mit Zinn(II)-chlorid-Lösung in Salzsäure gekocht, wodurch aus Dithiocarbamaten und Thiuramdisulfiden Schwefelkohlenstoff freigesetzt wird. Ein Trägergas (etwa 150 ml/min) führt CS2 durch Kühler und Waschflaschen mit Natronlauge und Schwefelsäure in gekühlte Rohre mit methanolischem Kaliumhydroxid, wo Kaliumxanthogenat entsteht. Die Absorption wird bei 302 nm mit Basislinienkorrektur bei 272 und 332 nm gemessen und auf eine Kalibrierkurve 1–40 µg CS2 bezogen; das Ergebnis ist die Rückstandssumme als mg CS2/kg.

Anwendungen

• Geringe Rückstände von Dithiocarbamat-Fungiziden und Thiuramdisulfid (z. B. Mancozeb, Maneb, Propineb, Thiram, Zineb) als Summe in CS2 (1)
• Lebensmittel pflanzlichen Ursprungs mit niedrigen Rückstandshöchstgehalten (1); Säuglingsnahrung — Prüfmenge 400 g (8.4.2)
• Obst und Gemüse, pflanzliche Lebensmittel mit hohem Wasser-, Säure- oder Stärke- und Proteingehalt, Getreideerzeugnisse für Kinder — Positionen in den Akkreditierungsumfängen von 5 Laboratorien bei PCA

Schlüsselparameter

Norm

Normnummer

PN-EN 12396-3:2002

Titel (PL)

Żywność o niskiej zawartości tłuszczu — Oznaczanie pozostałości ditiokarbaminianów i disiarczku tiuramu — Część 3: Metoda ksantogenianowa z wykorzystaniem spektrometrii UV

Title (EN)

Non-fatty foods — Determination of dithiocarbamate and thiuram disulfide residues — Part 3: UV spectrometric xanthogenate method

Schritt-für-Schritt-Verfahren

1. Probe und Prüfmenge

   Teil, für den der Höchstgehalt gilt; Lagerung bei 0–5 °C bis 2 Tage oder −20 °C; Prüfmenge bis 200 g, nur auf Kolbenhalsgröße geschnitten, sofort zur Analyse (7). PN-EN 12396-3:2002 ohne Zurückziehungsvermerk (03.10.2026).

2. Kalibrierung und Blindwerte

   16 Lösungen 1–40 µg CS2 in KOH II, 45 min, lineare Kurve; Reagenzien- und Matrixblindwerte, Wiederfindung auf Höchstgehaltsniveau (8.2, 8.3).

3. Vorbereitung der Apparatur

   NaOH, H2SO4 und 2 × KOH I in den Rohren, Eiskühlung, Gas etwa 150 ml/min (8.4.1).

4. Zersetzung und Destillation

   Prüfmenge im Kolben, 240 ml SnCl2–HCl über den Trichter, rasch zum Sieden, insgesamt 30 min (8.4.2).

5. Messung

   Rohre 3 und 4 getrennt in 10-ml-Kolben, mit KOH I aufgefüllt, nach 15 min Absorption bei 272, 302 und 332 nm, A_corr (8.4.3).

Erforderliche Geräte und Apparatur

Reagenzien, Nährmedien und Verbrauchsmaterialien

Arbeitsschutz und Sicherheit

• Dithiocarbamate, Thiuramdisulfide und Schwefelkohlenstoff sind auf verschiedenen Expositionswegen giftig, besonders konzentriert — Sicherheitsdatenblätter des Herstellers (8.1)
• Dämpfe einiger Lösemittel sind giftig und werden leicht über die Haut aufgenommen — wirksame Abzüge (8.1)

Häufige Fragen