Proteaza z B. subtilis CBS 148232 z przetrwalnikami trzech szczepów Bacillus dla tuczników: aktywność kolorymetrycznie na barwionej kazeinie (pH 10, 50 °C), szczepy PFGE wg CEN/TS 17697, liczba bakterii wg EN 15784 — minimum 5000 U i 1,5 × 10⁸ jtk/kg
Rozporządzenie wykonawcze Komisji (UE) 2025/2502, opublikowane 12 grudnia 2025 r., dopuszcza do 1 stycznia 2036 r. preparat Genencor International B.V. (4a63, w opinii EFSA: Syncra® SWI 201 TPT) — proteazę (EC 3.4.21.62) z genetycznie zmodyfikowanego szczepu B. subtilis CBS 148232 i żywe przetrwalniki B. velezensis NRRL B-50508, B. velezensis NRRL B-50509 oraz B. subtilis NRRL B-50510 — jako substancję polepszającą strawność dla tuczników wszystkich gatunków świniowatych i prosiąt odsadzonych podrzędnych gatunków. Wniosek dla prosiąt ssących wnioskodawca wycofał 27 czerwca 2025 r.
- Metody z załącznika: proteaza w dodatku, premiksach i paszach — metoda kolorymetryczna oparta na hydrolizie barwionego, usieciowanego substratu kazeinowego przy pH 10,0 i 50 °C; identyfikacja szczepów — elektroforeza pulsacyjna w zmiennym polu elektrycznym (PFGE) wg CEN/TS 17697 lub sekwencjonowanie DNA; Bacillus spp. ogółem — posiew powierzchniowy na agarze tryptonowo-sojowym wg EN 15784. Jednostka aktywności to ilość enzymu uwalniająca 2,3 µg związków fenolowych (jako tyrozyna) z kazeiny na minutę w tych warunkach.
- Skład: co najmniej 50 000 U/g proteazy i 1,5 × 10⁹ jtk/g Bacillus spp. (szczepy w stosunku 1:1:1), olej mineralny ≤ 0,4 %, alkohol poliwinylowy ≤ 3,5 %. Pięć partii według EFSA: 67 120–73 560 U/g (średnio 70 340) i 4,6–8,0 × 10⁹ jtk/g; w trzech partiach arsen 0,06–0,10, kadm 0,03–0,04, ołów 0,16–0,26 mg/kg, rtęć < 0,005 mg/kg, B. cereus < 10 jtk/g; pylność 106–133 mg/m³.
- Trwałość: po 15 miesiącach w 25 °C spadek o 0,6 log bakterii i 18 % aktywności, po 12 miesiącach w 40 °C — o 0,6 log i 38 %; w premiksie po 6 miesiącach −9 % aktywności; granulowanie w 95 °C — −7,6 % aktywności, bez strat bakterii. Jednorodność w paszy: CV 1,7 % dla bakterii i 8 % dla aktywności proteazy.
- Wnioskodawca proponował minimum 1250 U i 3,75 × 10⁷ jtk/kg paszy, a EFSA (opinia z 29 stycznia 2025 r.) wskazała możliwą skuteczność przy 5000 U i 1,5 × 10⁸ jtk/kg — te wartości weszły do aktu jako minimalna zawartość. Na pytanie Komisji EFSA potwierdziła 5 maja 2025 r., że „inne podrzędne gatunki świń na tym samym etapie fizjologicznym” to prosięta odsadzone lub tuczniki podrzędnych gatunków. Preparat nie drażni oczu ani skóry, ale uczula skórę i drogi oddechowe.